Fałszywy wynik PCR

Objawy

Nasze zalety:

  • Niedrogie otrzymanie lekarza od 900 rubli
  • Pilnie Analizy w dniu leczenia od 20 minut do 1 dnia
  • Zamknij 5 minut od stacji metra Varshavskaya i Chistye Prudy
  • Dogodnie pracujemy codziennie od 9 do 21 każdego dnia (w tym święta)
  • Anonimowo!

Łańcuchowa reakcja polimerazy jest prawdopodobnie jedną z najbardziej czułych i najdokładniejszych metod diagnozowania różnych chorób zakaźnych, zwłaszcza tych, które są przenoszone drogą płciową. Wyznaczanie nawet niewielkiej ilości cząsteczek DNA bakterii, wirusów, grzybów, PCR jest raczej specyficzną metodą, która rzadko daje fałszywie pozytywne wyniki.

Fałszywie dodatni wynik oznacza, że ​​właściwie nie ma infekcji, a reakcja jest pozytywna.

Ale nawet z dokładnością 98-99%, czasami reakcje PCR mają również błędne odpowiedzi, które prawie nigdy nie są związane z samą odpowiedzią, ale bardziej z naruszeniami na wstępnym etapie.

Przyczyny fałszywie dodatniego wyniku analizy PCR są następujące:

  • Termin do przeprowadzenia badań kontrolnych po leczeniu zakażeń seksualnych nie został utrzymany. Faktem jest, że większość infekcji znajduje się wewnątrz komórek lub utrwala się na powierzchni ich błon. Podczas pełnego leczenia czynnik chorobotwórczy STI ginie, ale cząsteczki jego genomu (DNA) pozostają przez jakiś czas w organizmie gospodarza. Potrzeba czasu, około 3 tygodni, aby komórki te zostały zastąpione nowymi, które nie kontaktowały się z czynnikiem zakaźnym, a następnie podjęto kontrolę. Jeśli weźmiesz test wcześniej, to ze względu na jego wysoką czułość, PCR określi DNA już martwych bakterii i wskaże na obecność czynnika, który będzie fałszywie dodatni, ponieważ infekcja już umarła.
    Nasi lekarze posiadają wystarczającą wiedzę z zakresu diagnostyki chorób przenoszonych drogą płciową i starzenia się, dlatego takie sytuacje w Klinice Prywatna praktyka są wykluczone.
  • DNA infekcji przenoszonych drogą płciową wchodzi do probówki z rąk wenerologa, z rękawic i sond urologicznych.
    Czynnik ten jest wykluczony, ponieważ tylko rękawice jednorazowe, probówki i sondy są używane do pobierania materiału.
  • Niezwykle rzadko uzyskuje się wyniki fałszywie dodatnie, jeśli w zeskrobkach występuje blisko spokrewniony mikroorganizm. Oznacza to, że analizator ujawnia obecność patogennej bakterii, która powoduje chorobę weneryczną, ale w rzeczywistości jest składnikiem normalnej mikroflory. Ale problem ten został od dawna rozwiązany poprzez wprowadzenie bardziej nowoczesnych i specyficznych systemów testowych.
  • Możliwe było również zanieczyszczenie lub wprowadzenie infekcji DNA do probówki na etapie badań laboratoryjnych, ale jest ona praktycznie wykluczona przez prawidłową organizację procesu diagnostycznego i szkolenie personelu.

W każdym przypadku diagnoza jest zawsze podejmowana nie tylko na podstawie wyników jednej analizy. Ostateczna diagnoza choroby przenoszonej drogą płciową jest połączeniem skarg, badania klinicznego i połączenia różnych metod laboratoryjnych i instrumentalnych.

Jeśli urolog, ginekolog lub wenerolog pojawiają się wątpliwości co do poprawności wyników PCR wykazały niezgodność lub istniejących klinicznych i laboratoryjnych danych diagnostycznych ze sobą, lekarz zawsze zalecić dalsze badania przy użyciu metody ELISA, NASBA, upraw, w celu wyjaśnienia sytuacji.

W naszych klinikach istnieją wszystkie dostępne metody nowoczesnej medycyny do badania mężczyzn i kobiet. Dlatego wykluczone jest ustalenie fałszywych diagnoz STI.

Lekarz kliniki "Prywatna praktyka" dermatovenereolog, urolog Volokhov EA opowiada o analizie PCR pod kątem infekcji.

Centrum Medyczne na Chistiye Prudy i Varshavka

Recepcja w naszych klinikach codziennie od 9.00 do 21.00

W SAD i SWAD - metro Varshavskaya, Kakhovskaya, Sevastopol - ul. Dom Bolotnikovskaya 5 budynek 2, tel. 8-499-317-29-72

W centrum (CAO) - metro Chistye Prudy, Turgenevskaya, Lubyanka - Krivokolenny lane house 10 strona 9, tel. 8-495-980-13-16

Testy STD

Przyszedłeś do ginekologa z reklamacjami absolutorium. W celu ustalenia przyczyny infekcji i wyboru odpowiedniego leczenia, lekarz przepisze testy. Co iw jakiej kolejności?

1. Bakteriokopia (rozmaz na flory). Pochwy pobierano po zwierciadeł wstawienia pod oczami kontrolnymi, z wykorzystaniem jednorazowego łopatki (laski z tworzywa sztucznego, z rozszerzonym końcem). Jeśli zaopiekujesz się sobą w darmowym leku i przyniosłeś ze sobą jednorazowy zestaw do badania ginekologicznego, wejdzie do niego łopatka. Niewłaściwe jest pobieranie próbek materiału do rozmazu za pomocą rękawicy (ponieważ talk, który przetwarza rękawiczki, może zniekształcić obraz); lustro (czasami, wyjęcie lustra, lekarz przesyła przydział do niego na szkle), tk. tam w zasadzie wypadają usunięte komórki z tylnego sklepienia pochwy; po dwuręcznego dochodzenia bez wkładania lustra (jako materiał zostanie podjęta musi odbywać się pod nadzorem oka, to znaczy zobaczyć, że bierzesz). Zabieranie wymazu to druga manipulacja lekarza po przejściu na fotel, pierwszym jest wprowadzenie lustra pochwy. Następnie światło skierowane do lustra i lekarz wykonuje celowniczy materiał łopatki co jest pożądane z trzech części, ale przynajmniej dwie ostatnie: zewnętrzny otwór cewki moczowej, pochwy i szyjki macicy. Dopiero po tym można wykonać zaawansowaną kolposkopię (zabarwienie szyjki macicy za pomocą roztworów) i badanie oburęczne. Procedura ta wynika z faktu, że roztwory stosowane do kolposkopii, zabicia bakterii, dzięki czemu bez znaczenia mazistą, a jeśli nie jest oburącz badania mikrotravmirovanie powierzchni szyjki, wymaz spadek złuszczone komórki, komórki krwi i utrudnia rozpoznanie zakażenia. Materiał pobrany za pomocą łopatki rozłożony jest równomiernie po przezroczystym szkiełku z szerokim pociągnięciem pędzla. Błędem jest nakładanie materiału grubą warstwą, kroplą, małym udarem - więc lekarzowi laboratoryjnemu będzie znacznie trudniej wykonać swoją pracę. Materiał, z różnych części oddzielnie, umieszczony na szybie, z tyłu od strony szkła: wacik miejscu oznaczonym „U” - cewkę, „C” - szyjka „V” - pochwy. Następnie szkło suszy się na powietrzu i wysyła do laboratorium.

W laboratorium rozmaz barwiono i badano pod mikroskopem.

Co może zobaczyć technik laboratoryjny:

a) Nabłonek. Komórki pokrywające pochwę i szyjkę macicy. Normalnie powinien być obecny. Ich liczba zmienia się w zależności od fazy cyklu miesiączkowego, stosowanych leków hormonalnych. Im więcej żeńskich hormonów płciowych (połowa cyklu, spożycie estrogenu, ciąża), tym więcej nabłonka. Brak komórek nabłonka może mówić o atrofii nabłonka, braku estrogenów, nadmiar męskich hormonów płciowych.

b) Leukocyty. Komórki, które pełnią funkcję ochronną, "jedzą" czynniki wywołujące infekcje. W przypadku stanu zapalnego w pochwie (zapalenia wsierdzia, zapalenia pochwy) ich ilość wzrasta proporcjonalnie do ciężkości i liczby patogenów. Zwykle liczba leukocytów w pierwszej fazie cyklu menstruacyjnego wynosi do 10 w polu widzenia (powierzchnia szkła widoczna pod mikroskopem), w drugim - 10-15 w polu widzenia. Podwyższone poziomy leukocytów są wystarczające do ustalenia faktu infekcji, ale nie na tyle, aby określić jego patogen. Bardzo pożądany jest patogen, aby prawidłowo wybrać antybiotyki.

c) Flora w kształcie pręcików (morfotyp Lactobacilli). Jest to normalna flora (mikroorganizmy, które muszą żyć w kwaśnym środowisku pochwy), z tym że nic nie powinno zostać wykryte w rozmazie.

Razem, przedstawione poniżej, w normalnym udarze nie powinno być:

d) Kokki. Bakterie mają kształt kulisty (w przeciwieństwie do pałeczek). Czasami pojawienie się wystarcza, aby postawić diagnozę (podwójne (podwójne) - rzeżączka, połączenie ziarniaków, małego pręcika i "kluczowych" komórek - bakteryjne zapalenie pochwy), czasami dla dokładnej diagnozy konieczne jest zasiewanie.

e. Mała różdżka. Najczęstsze bakterie beztlenowe (nie wykorzystujące tlenu), gardnerelles. Oznaka infekcji lub dysbiozy pochwy, szczególnie gdy jest ich więcej niż pałeczek kwasu mlekowego.

e. Komórki "kluczowe". Komórki nabłonka, "zaschnięte" małym prętem. Objawem bakteryjnego zakażenia pochwy - pochwy dysbakterioza - stan, w którym zamiast aerobowe (bakterie kwasu mlekowego) kislorodolyubivoy mnożyć w pochwie organizmów beztlenowych, w tym małych prętów.

f. Grzyby. Patogenna patogeneza (drozd). W zależności od nasilenia procesu mogą występować zarodniki grzybów (niewyjaśniona kandydoza, prawdopodobnie bez objawów), strzępki, grzybnia grzybów (pospolita kandydoza).

h. Trichomonases. Całe lub zniszczone. Podniecające rzęsistkowica. Duże organizmy jednokomórkowe z wici.

Wykrywanie "g" przedmiotów w rozmazie pomaga ustalić przyczynę zapalenia jelita grubego i wybrać odpowiednie antybiotyki. Można jednak spotkać się z sytuacją, w której oprócz białych krwinek w rozmazie nie ma nic więcej nie wykryto. Przyczyny:

a). Definicja patogenów wymaga większej kwalifikacji asystenta laboratoryjnego niż obecności leukocytów.

b). Wirusowe, mykoplazmatyczne, chlamydiowe zakażenie. Te mikroorganizmy są tak małe, że nie są widoczne w mikroskopie. Do ich diagnozy stosowane są inne metody.

c). Za dużo leukocytozy, gdy ich liczba przekracza 100 w polu widzenia (czasami pracownicy laboratoriów piszą "leukocyty pokrywają wszystkie pola widzenia"). Oznacza to, że rozmaz zawierał materiał zawierający tylko zniszczone komórki i leukocyty, ropę. Patogeny w wykrywaniu ropy prawie nigdy nie zawodzą.

g). Nieprawidłowy odbiór materiału (patrz wyżej).

Dzieje się tak, gdy odchody są niepokojące, lekarz przyznaje, że rozmaz jest zły i trzeba go leczyć, ale nic nie znaleziono i nie jest jasne, co leczyć. Oto 3 opcje:

a) w przypadku jakichkolwiek wątpliwości co do poprawności pobrania materiału i kwalifikacji asystenta laboratorium, należy ponownie pobrać rozmaz

b) Jeśli nie ma wątpliwości - przekaż materiał do wysiewu lub diagnostyki PCR. Te metody są bardziej czułe. Ta ostatnia pozwala wykrywać wirusy, chlamydie, mykoplazmy.

c) jeżeli "krwinki białe całkowicie pokrywają wszystkie pola" - ustanawia się uniwersalny schemat terapeutyczny, tj. zestaw antybiotyków o szerokim spektrum działania, które wpływają na wszystkie możliwe bakterie. Jeśli to nie doprowadzi do całkowitego wyleczenia, to przynajmniej zmniejsza liczbę białych krwinek, co pozwala ci wziąć materiał do dalszego poszukiwania patogenów.

Bakteriozopja rozmazu jest wykonywana w ciągu jednego dnia, z typowym zabarwieniem błękitu metylenowego - w ciągu 15 minut.

Jakość rozmazu i wyniku zależy przede wszystkim od poprawności pobrania materiału, a w dalszej kolejności od kwalifikacji asystenta laboratorium. Skuteczność leczenia zależy ponadto od wiedzy ginekologa, który przepisuje schemat leczenia.

2. Badanie bakteriologiczne (zasiew, metoda hodowli). Rosnące bakterie na pożywkach. Metoda ta jest znacznie bardziej czuła niż mikroskopia, ponieważ umożliwia wykrycie patogenu w jego niskim stężeniu, gdy nie wpada w rozmaz. Analizę przeprowadza się ponownie po włożeniu lustra, pod kontrolą oka z kanału szyjki macicy za pomocą specjalnego sterylnego tamponu. Po otwarciu jednorazowej probówki z tamponem (jest ona zaplombowana metodą fabryczną) i bez dotykania czegokolwiek, włóż tampon do kanału szyjki macicy. Jeden ruch i bez dotykania czegokolwiek, tampon wraca do probówki i szczelnie zamknięty. Najważniejszą rzeczą przy pobieraniu materiału do zaszczepienia jest sterylność, tak aby bakterie mogły dostać się z badanego obszaru, a nie z powietrza, skóry itp.

W laboratorium tampon dotyka pożywki (żelatyny lub agar-agar), na której rosną bakterie. Zwykłe uprawy są wytwarzane z dostępem powietrza, tj. Bakterie beztlenowe (wolne od tlenu) nie mogą rosnąć. Możliwe jest również ich zasiewanie, ale jest to specjalne badanie, którego nie przeprowadza się we wszystkich laboratoriach. Dla wzrostu wirusów (opryszczki), chlamydia wymaga specjalnych warunków i środowiska (tak jak to wewnątrzkomórkowe pasożyty, nie mogą one rosnąć prosto na składniki odżywcze potrzebne im kultury żywych komórkach. W związku z tym, w normalnym siewu nie można wykryć obecność Chlamydia) jest oddzielną analizy.

Metoda kulturowa (bakteriologiczna, bakteriozy) to tzw. "złota standardowa" diagnoza wielu zakażeń i główna metoda monitorowania skuteczności leczenia. Jest znacznie bardziej czuły i specyficzny (patrz poniżej), konwencjonalny rozmaz i ma przewagę nad diagnostyką DNA (PCR). Faktem jest, że ważne jest, aby nie znaleźć drobnoustroju, ale udowodnić, że to on wywołuje infekcję, a to nie jest to samo. W organizmie często występują mikroorganizmy, tzw. „Warunkowe patogenami” (na przykład, Gardnerella), które normalnie nie powodują choroby, ale ze zmniejszeniem odporności, rozwoju dysbioza - może powodować. Ich wykrycie nie dowodzi ich roli w rozwoju infekcji. Ale ich wzrost na pożywkach mówi, że są one, po pierwsze, opłacalne (mogą rosnąć i powodować choroby), a po drugie, liczne (niektóre mikroby są tłumione przez tych, którzy są bardziej, a następnie w ośrodku nie rośnie czynnika zakaźnego, ale normalna flora). Kolejną zaletą jest to, że badania bakteriologicznego to pozwala policzyć inicjatora (liczba kolonii) oraz określenie wrażliwości na antybiotyki (w pożywce hodowlanej dodaje różne antybiotyki i oglądać od leku bakterie są zabijane). Jedyną wadą tej metody jest czas jej wykonania (bakterie rosną kilka dni) oraz dokładność w laboratorium.

3. Diagnostyka DNA (PCR). Diagnostyka DNA obejmuje kilka metod, ale najczęstszą jest reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR). Jest to wykrycie w materiale DNA patogenu. DNA jest cząsteczką, w której zawarte są wszystkie informacje o komórce. W komórkach organizmów jednego gatunku (na przykład mykoplazm narządów płciowych) niektóre obszary DNA są takie same. Dlatego znając strukturę tych obszarów w głównych patogenach, można utworzyć kopie lustrzane, które znajdą i komunikują się z nimi. Znalezienie nawet jednej takiej strony wystarczy, aby zapewnić pozytywną reakcję PCR. Wskazuje to na wyjątkowo wysoką czułość metody.

Metoda jest dobra do diagnozowania zakażeń niewykrywalnych w rozmazach: chlamydii, opryszczce narządów płciowych. Jednak w celu określenia skuteczności leczenia tych samych chorób, metoda jest nie do przyjęcia, ponieważ a po rozpadzie komórek w ciele mogą pozostać fragmenty DNA. Jedynie zdolne do reprodukcji mikroorganizmy mogą służyć jako oznaka nieuleczania i można je wykryć jedynie przez sieje. Jednak nie wszystkie metody są dostępne. Pasożyty wewnątrzkomórkowe w normalnym zasiewie nie mogą być ustalone, a jeśli laboratorium nie wykonuje specjalnych badań bakteriologicznych na hodowli komórkowej, wówczas reakcja PCR powinna być zadowalająca - wtedy należy ją wykonać nie wcześniej niż 3-4 tygodnie po zakończeniu leczenia

Nie jest również pożądane stosowanie metody PCR do diagnozowania gardnerelleza, ponieważ te bakterie są normalnie zawarte w pochwie. Nie powinny znajdować się w rozmazie, w tym przypadku bakterioskopia jest wystarczającą metodą diagnozowania gardnerellez i kontrolowania leczenia. A DNA tych bakterii może i powinno być, nie jest kryterium choroby.

Pozytywny wynik PCR na ureaplasmie (biovar) i mykoplazmie nie jest kryterium rozpoznania i leczenia - patrz artykuł Mycoplasma and ureaplasma

Materiał do PCR pobiera się z kanału szyjki macicy, czasami z zewnętrznego otworu cewki moczowej za pomocą specjalnej jałowej jednorazowej szczotki. Przed pobraniem materiału, śluz i wydzielina za pomocą bawełnianego wacika są zawsze usuwane, nieprzestrzeganie tej zasady często prowadzi do fałszywych wyników. Większość badanych drobnoustrojów to pasożyty wewnątrzkomórkowe, więc konieczne jest wykrycie komórek, a nie ekskrementy, które uniemożliwiają dotarcie do nabłonka. Następnie materiał ze szczotki umieszcza się w pojemniku z roztworem soli fizjologicznej, który przed analizą musi być przechowywany w lodówce. Najważniejsze jest przestrzeganie sterylności.

Przyczyny fałszywych wyników PCR:

1. Nieprzestrzeganie zasad spożycia materiału - usunięcie śluzu z kanału szyjki macicy. Najczęstszy powód. Nie możesz tego kontrolować. Jedyne, co możesz zrobić, to wybrać ginekologa, któremu ufasz.

2. Niezgodność z zasadami PCR w laboratorium. Z tego powodu ty też nie możesz kontrolować, leży to w sumieniu laboratoriów.

3. Ponownie nieprawidłowość przy materiału - materiał się do DNA bakterii z powietrza, z tym, szklana osłona (często jakiś materiał ulega reakcji PCR jako konwencjonalny rozmazu na szkło, które jest tak, ponieważ szkło może nie być sterylne.). Sterylność można naruszyć w laboratorium, jeśli obcy będą często chodzić po próbce roboczej i "wylewać" różne DNA z ubrań. Ty też tego nie sprawdzasz.

Dlatego, mimo że PCR jest najbardziej czułą i specyficzną metodą diagnostyczną, ma swoje wady. Wyniki powinny być analizowane przez lekarza prowadzącego, biorąc pod uwagę możliwość wszystkich powyższych. Rozpoznanie opiera się na dolegliwościach i objawach. Każda metoda diagnostyczna jest opcjonalna, nie można jej w 100% polegać.

4. Oznaczanie przeciwciał we krwi (metoda serologiczna) - najczęściej za pomocą testu ELISA (immunoenzymatycznego).. Dodatkowa metoda diagnozy, która umożliwia odróżnienie ostrej choroby, jej pierwszego epizodu od zaostrzenia przewlekłego zakażenia. Zwłaszcza ta metoda jest często stosowana w ciąży po wykryciu patogenu metodą PCR, aby określić prawdopodobieństwo zakażenia dziecka. Najbardziej niebezpieczne dla organizmu i najczęściej przenoszone do dziecka jest zakażenie pierwotne (pierwsze trafienie od patogenu), gdy układ odpornościowy nie jest jeszcze spotkał się z mikroorganizmów i nie mają doświadczenia, aby sobie z tym poradzić. W odpowiedzi na patogen wnikaniem do krwi tworzą przeciwciał - substancje, które wiążą się do nich i starają się wycofać z organizmu. W pierwotnej infekcji wytwarzane są przeciwciała tej samej klasy. immunoglobuliny M. Ich obecność we krwi sugeruje, że organizm jest chory i jest wskazaniem do leczenia infekcji. Później zaczyna produkować innych przeciwciał - immunoglobuliny G. Są one zapisywane i po leczeniu, niektóre infekcje (takie jak różyczka) - na zawsze. Znalezienie krwi immunoglobuliny G mówi, że ciało wcześniej spotkał się z infekcją i opracowany odporność przeciwko niej, że to dobry znak, że nie wymaga leczenia. Jednoczesna obecność obu klas immunoglobulin sugeruje zaostrzenie przewlekłego zakażenia i wymaga leczenia. Kiedy immunoglobuliny G i podejrzenie infekcji (objawy zakażenia płodów) tylko po 2 tygodniach prowadzenia powtórnej analizy definicji miana (ilość) przeciwciała. Ostry wzrost miana (4 razy) wskazuje na aktywację infekcji i wymaga leczenia.

Oznaczanie przeciwciał we krwi głównych patogenów (toksoplazma, różyczka, wirus cytomegalii, opryszczka) u kobiet w ciąży jest nazywane Kompleks TORCH. W przypadku wszystkich tych infekcji bardzo ważne jest, czy kobieta była wcześniej chora, tj. jeśli ma immunoglobuliny we krwi, a jeśli nie, to istnieje możliwość rozwinięcia pierwotnej infekcji podczas ciąży i uszkodzenia płodu. W takim przypadku należy uważać na możliwą infekcję i regularnie sprawdzać zawartość przeciwciał.

Przeciwciała przeciwko opryszczce. Najczęściej, jeśli nie wskazano na samej formie - przeciwciała przeciwko HSV1 i HSV 2 (i nie zobowiązują się podwoić cenę) - pobrano krew w celu określenia mieszane przeciwciał wobec obu typów wirusa. A ponieważ opryszczka typu 1 prawie wszyscy zachorowaliśmy w dzieciństwie, 98% dorosłej populacji ma przeciwciała przeciwko niemu, a analiza będzie pozytywna, nawet jeśli nigdy nie miałaś opryszczki narządów płciowych. Dlatego ta analiza nie ma prawie żadnej wartości i może zaoszczędzić pieniądze. Jedynym wskazaniem jest to, że jesteś w ciąży i wydaje Ci się, że nigdy nie miałeś jednego typu opryszczki (gorączka na ustach). Następnie przeprowadzić tę analizę, a jeśli rzeczywiście istnieją żadnych przeciwciał w ogóle, tym bardziej jest to konieczne, aby chronić się przed ewentualnym zakażeniem, nawet te „niewinne” opryszczki typu 1, ponieważ a jego pierwotna infekcja może uszkodzić płód. (Moskwa ma laboratoriów, które sprawiają, że przeciwciała przeciw HSV typu 2 bez przeciwciał HSV typu 1, ale ze względu na wysokie koszty importowanych odczynniki takie analizy - rzadkie).

W celu oznaczenia przeciwciał pobiera się krew z żyły. Znowu wiele zależy od poziomu laboratorium i jakości odczynników.

Wrażliwość metody - liczba pozytywnych wyników (wykrytych bakterii) w obecności patogenów w materiale. Czułość wynosząca 80% oznacza, że ​​w 80% przypadków obecności bakterii w materiale ta metoda pozwoli na ich wykrycie.

Specyfika metody - prawdopodobieństwo, że wynik pozytywny jest prawdziwy. Swoistość wynosząca 80% oznacza, że ​​w 80% pozytywnych wyników testu ten czynnik sprawczy jest rzeczywiście obecny. Pozostałe 20% pozytywnych testów jest w rzeczywistości fałszywie dodatnich.

Fałszywy wynik dodatni - sytuacja, w której wynik analizy jest pozytywny (wykryto bakterię), ale w rzeczywistości tak nie jest. Im wyższa czułość i mniejsza specyficzność metody, tym większe prawdopodobieństwo fałszywie dodatnich wyników. Dla pacjenta fałszywie dodatni wynik oznacza niepotrzebny niepokój, poszukiwanie cudzołóstwa (które zaraziło się) i nieuzasadnione leczenie.

Szczególnie niepożądane jest otrzymanie fałszywie dodatniego wyniku po leczeniu. Był leczony i leczony, ale pozostał chlamydia. Środki, źle traktowane? Lub znowu partner jest zainfekowany? Czy są one przekazywane za pomocą środków gospodarstwa domowego? Jest to najczęstsze z pytań ginekologicznych wysyłanych na stronę. Głównym powodem jest to, że te same bardzo czułe metody (na przykład PCR) zostały użyte do kontroli skuteczności leczenia, tak jak w przypadku pierwotnej diagnozy. Jedna niefortunna, od dawna martwa cząsteczka DNA ze zniszczonej komórki chlamydii może zostać złapana i dać fałszywie dodatni wynik, ale bez chlamydii. Dlatego "złotym standardem" do ponownej analizy po obróbce jest zasiew. Jeśli infekcja zostanie pokonana, zdecydowanie nie będzie rosnąć.

Wynik fałszywie ujemny - ujemny wynik analizy (nie pojawienie się patogenu), gdy jest obecny w organizmie. Występuje, gdy stosowane są metody niskiej czułości (bacterioscopy). Dla pacjenta nieprzyjemne jest konieczność wielokrotnego dostarczania płatnych analiz.

Metody zwalczania fałszywych wyników:

1. Wyszukaj wykwalifikowane laboratorium i ginekologa

2. Wybór właściwej metody diagnozy dla konkretnej sytuacji i przestrzeganie zasad analizy.

3. Leczenie objawów, a nie wyników testu. Modny PCR daje wystarczającą liczbę wyników fałszywie pozytywnych. Dla centrów handlowych jest to bardzo cenna cecha tej metody. Ale kompetentny pacjent nie powinien mieć możliwości leczenia swoich testów. Bardzo częsta sytuacja - "udał się do zbadania, znalazł ureaplasma, co robić?" Traktuj to, co Cię niepokoi. Jeśli nic innego, co nieuniknione przewóz niektórych innych niż niebezpieczne i nebespokoyaschih mikroorganizmów (Ureaplasma, Mycoplasma, Gardnerella, pojedynczego Candida, HPV, opryszczka, CMV) nie wymaga leczenia, aw przypadku stwierdzenia bezwzględnej patogen (gonococcus, Chlamydia, Trichomonas) Analiza odbić, w tym inne metody - a gdy diagnoza zostanie potwierdzona, wykonywane jest leczenie.

Czy są możliwe błędy PCR? Fałszywie ujemne i fałszywie dodatnie wyniki PCR

Aby otrzymać fałszywe wyniki w diagnostyce PCR - zarówno fałszywie dodatnie, jak i fałszywie ujemne - mogą występować różne okoliczności.

Zastosowanie reakcji łańcuchowej polimerazy - PCR - wymaga ścisłego przestrzegania wszystkich etapach procesu analizy, z analizy ogrodzenia lekarza do interpretacji wyników analizy. Jak informacyjna analiza PCR zależy od wielu okoliczności.

  • Fałszywy pozytywny wynik analizy może wynikać z dostania się do materiału (wymazu lub zeskrobania cewki moczowej) krwi.
  • Podobne fałszywie dodatnie wyniki analizy PCR uzyskano ze względu na brak komórek nabłonka w materiale, ale zawartość dużej ilości całkowicie nieinformatywnego śluzu.
  • Na otrzymanie wyników analizy fałszywego DNA ma wpływ niewłaściwy transport i przechowywanie uzyskanych próbek. Infekcja DNA w tym przypadku może zostać zniszczona, aw konsekwencji - wynik fałszywie ujemny.
  • Zaburzenia sterylności podczas diagnostyki PCR są kolejnym powodem fałszywie dodatniego PCR. W zebranym materiale pacjenta obce bakterie mogą dostać się z rąk lekarza, od odzieży, ze szkła lub zanieczyszczonych narzędzi, do naczyń wielokrotnego użytku. W rezultacie znaleziono "nieistniejącą" infekcję.
  • Nieodpowiednie odczynniki. Nieograniczone i przestarzałe laboratorium, w którym lekarze "przymykają oczy" na niezdatność odczynników, to kolejny poważny powód niewiarygodnej diagnozy. Oczywiście znacznie obniża to koszty diagnostyki laboratoryjnej, ale nie może nie wpływać na jej wyniki.

W celu uniknięcia takich błędów, lekarze z centrum medycznego „Evromedprestizh” bardzo poważnego podejścia do prowadzenia diagnostyki laboratoryjnej: wykorzystanie materiałów tylko jednorazowych na wszystkich etapach analizy przestrzegania niezbędnych środków dla utrzymania pełnej laboratorium jałowości i biurze lekarza. Mamy tylko najwyższej klasy lekarzy i doświadczonych asystentów laboratoryjnych, którzy regularnie podnoszą swoje kwalifikacje, aby nie leczyć nieistniejących chorób, ale uzyskać wiarygodne wyniki.

Jeśli możliwe jest fałszywie dodatnie badanie na kiłę

Analiza definicji kiły jest niezbędna, aby dana osoba wzięła prawie wszystkie z nich: zatrudnienie, badania lekarskie, badania profilaktyczne, ciąża. Wdrożenie tych badań jest konieczne - pozwalają one zidentyfikować chorobę we wczesnych stadiach, kiedy leczenie będzie miało najwyższą skuteczność.

Uzyskany pozytywny wynik często stawia osobę w ślepym zaułku, zwłaszcza w przypadku braku jakichkolwiek przyczyn. Wykrywanie kiły fałszywie dodatniej jest dość częstym zjawiskiem, dlatego nie należy wpadać w panikę zbyt wcześnie. Według informacji z różnych źródeł, nawet 30% badań podstawowych może dać zły wynik. Istnieje wiele przyczyn tego zjawiska: zmiana stanu organizmu, chorób somatycznych. Aby lepiej zrozumieć, dlaczego się pojawiają, warto bardziej uważnie zrozumieć kwestię badań.

Rodzaje testów na kiłę

Metody badań klinicznych szybko się poprawiają każdego roku. Wraz z rozwojem nowych metod diagnostycznych, fałszywie dodatnia reakcja na kiłę jest coraz mniej powszechna. Jeśli to konieczne, diagnoza może obejmować kilka różnych metod - to pozwala uzyskać najbardziej wiarygodny wynik.

Bezskrętne metody badań

Techniki te mają na celu identyfikację białek, które powstają w wyniku działania jasnych krętków. Mają one na celu określenie "śladów" patogenu. Takie metody mają stosunkowo wysoki procent błędu (do 10%). Takie techniki są niespecyficzne, ale pozwalają na miano przeciwciał w celu określenia stopnia infekcji.

Reakcja Wassermanna RW

Najczęstszą analizą, przeprowadzaną w celu wykrycia bladego treponema, jest badanie serologiczne krwi. Reakcja Wassermana pozwala nam określić obecność choroby w ciągu kilku minut. Dlatego ta technika jest najczęściej stosowana w laboratoriach - nie wymaga wiele czasu i ma stosunkowo niski koszt.

Do przeprowadzenia analizy wykorzystuje się płyn mózgowo-rdzeniowy lub krew. Materiał do pobierania próbek można pobrać z palca (jeśli tylko jeden jest analizowany) lub z żyły (jeśli wymagane są różne badania). W wyniku analizy może być nie tylko fałszywie pozytywny, ale także fałszywie ujemny. Jest to możliwe w następujących okolicznościach:

  • wczesny etap infekcji, kiedy ilość treponu w organizmie jest wciąż niska;
  • choroba przewlekła na etapie remisji, gdy zmniejsza się liczba przeciwciał.

Zwróć uwagę! Wynik fałszywie ujemny pojawia się niezwykle rzadko, a zatem, jeśli występuje co najmniej jeden plus z czterech, konieczne jest poddanie się dodatkowemu badaniu.

Mikroretacja recyklingu (MR)

Ta metoda badania opiera się na reakcji antygen-przeciwciało. Wymaga niewielkiej ilości materiału do wykonania. Jego celem jest wykrywanie przeciwciał antylipidowych, które są wytwarzane w procesie niszczenia komórek przez treponemę. Do badania wykorzystuje się zarówno krew pacjenta, jak i płyn mózgowo-rdzeniowy.

Ponieważ zniszczenie komórek może wystąpić nie tylko w przypadku kiły, analiza jest stosowana jako badanie przesiewowe, a nie potwierdzające. Istnieją dwa analogi tej techniki:

  • Test mikroskopowy (VDRL). Aby przeprowadzić analizę, stosuje się inaktywowaną surowicę krwi. Jeżeli podejrzewa się uszkodzenie układu nerwowego kiłą, jako materiał badawczy stosuje się płyn rdzeniowy.
  • Test makroskopowy (RPR). Jest uważany za metodę ekspresowej diagnostyki. Stosuje się wizualne obliczenie reagentów plazmy.

Ta reakcja, jeśli nie jest zachowana niezbędna sterylność, może dawać fałszywie dodatni wynik. Pojawienie się takiej analizy jest również możliwe przy nieswoistym uszkodzeniu tkanek, które pociąga za sobą zniszczenie lipidów. Jeśli wynik jest pozytywny, do potwierdzenia zaleca się obowiązkowy test kręcenia.

Treponemalne metody badań

Ta kategoria analiz dostarcza najdokładniejszych danych i rzadko pojawiają się fałszywie pozytywne wyniki. Badania mają na celu identyfikację konkretnych białek, które są uwalniane przez organizm w odpowiedzi na infekcję. Metody te mają wyższy koszt i dlatego są używane jako potwierdzenie, a nie jako kwalifikacja.

Specyficzne przeciwciała zaczynają być produkowane przez organizm tylko kilka tygodni po zakażeniu treponemą. Mogą przetrwać przez dłuższy czas, aby wyleczyć chorobę. Dlatego określone testy mogą wykazywać pozytywne wyniki przez długi czas po remisji.

Zwróć uwagę! Przy dodatnim RW i ujemnym specyfiku, ponownie stosuje się badanie po kilku tygodniach.

Analiza immunoenzymatyczna (ELISA, EIA)

Opiera się na ocenie poziomu immunoglobulin IgA, IgB i IgM. Pierwsze dwa typy białek są produkowane w organizmie od 2 tygodni zakażenia, a IgM - miesiąc po zakażeniu.

Interpretacja analizy jest przeprowadzana na podstawie stosunku obecności immunoglobulin:

  • Wykryto tylko IgA - od infekcji upłynęło nie więcej niż 14 dni;
  • Infekcje IgA i IgB wykryto od 14 do 28 dni wcześniej;
  • znaleziono wszystkie trzy typy - kiła w organizmie ponad 28 dni;
  • Rozpoznano tylko IgM - kiłę późną.

Obecność IgM może być oznaką wyleczonej już kiły - synteza immunoglobulin IgM może trwać kilka miesięcy po remisji.

Reakcja immunofluorescencji (RIF, FTA)

Używany do potwierdzenia infekcji na najwcześniejszych etapach. Do badania pobierana jest krew z palca lub żyły. Wynik jest podobny do analizy RW, gdzie wskazano minus lub od 1 do 4 plusów. Jeśli istnieje co najmniej jeden plus, można przypisać dodatkowe badanie.

Niezwykle rzadko zdarza się znaleźć fałszywie dodatnie wyniki podczas wykonywania RIF - mogą to być kobiety w ciąży, a także pacjenci z chorobami tkanki łącznej.

Reakcja aglutynacji biernej (TPHA, TPHA)

Miano przeciwciał pozwala określić obecność kiły i jej stadium. Wiarygodne dane tej techniki dają już od 28 dni po infekcji. Do oceny wykorzystuje się krew z palca lub żyły. Zwiększenie liczby przeciwciał oznacza dalszy etap choroby.

Najdokładniejsze metody badawcze

Analizy tej grupy są bardzo czułe, dlatego błąd w ich wynikach jest bardzo niski. Wyróżniają się wyższym kosztem w porównaniu z innymi metodami oraz bardziej wyrafinowaną techniką wdrażania.

Reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR)

Analiza PCR jest uważana za jedną z najbardziej dokładnych. Ma na celu określenie obszarów chorobotwórczego DNA w ludzkim ciele. Metoda wymaga specjalistycznego sprzętu i odczynników, dlatego też jest stosowana w rzadkich przypadkach.

Imunoblotting

Połączona metoda badania. Jego celem jest określenie immunoglobulin w surowicy krwi pacjenta. W analizie sprawdzono obecność kompleksu przeciwciał, zgodnie z którym ustalono diagnozę. W tej technice stosuje się elektroforezę, z którą rozdzielane są czynniki immuno-determinujące, oraz test ELISA, który wykazuje rozdzielone punkty.

Reakcja unieruchomienia jasnych treponemów (RIBT)

Bardzo specyficzna analiza, która określa odpowiedź surowicy krwi na bladą treponemię. Jest szeroko stosowany na całym świecie, ponieważ ma wysokie prawdopodobieństwo dokładnego wyniku. Specjalne przeciwciała (immunomobiliziny) u pacjenta z kiłą są w stanie unieruchomić treponem. We krwi zdrowej osoby nie ma takich przeciwciał. To na podstawie obecności / braku tej zdolności oparta jest metodologia badań.

RIBT służy do identyfikacji tych odmian kiły, w których reakcja Wassermana daje negatywne wyniki - porażkę układu nerwowego, narządów wewnętrznych, utajoną postać choroby. Fałszywie pozytywny wynik w krajach WNP występuje niezwykle rzadko. Przyczyną jego pojawienia się może być sarkoidoza, trąd.

Przyczyny fałszywie pozytywnych wyników

Reakcja Wassermana może określić "ostre" i "przewlekłe" wyniki fałszywie dodatnie. Jego dotkliwość zależy od natury zmian w kondycji człowieka. Stopień zaostrzenia RW można wykazać w takich przypadkach:

  • choroby zakaźne w fazie zaostrzenia;
  • urazy pourazowe;
  • zawał mięśnia sercowego;
  • wprowadzenie jakiejkolwiek szczepionki na kilka dni przed testem;
  • zatrucie pokarmowe.

Warunki te charakteryzują się zwiększoną pracą układu odpornościowego, co prowadzi do zwiększonej produkcji przeciwciał. Są one błędnie rozpoznawane w reakcji jako przeciwciała przeciwko obrzękowi, a zatem powstaje pozytywny wynik.

W obecności patologii o przewlekłym charakterze układ odpornościowy wytwarza dużą liczbę niespecyficznych przeciwciał, które mogą powodować reakcję. W RW stan ten może pokazywać wynik fałszywie dodatni. Dlatego warto ostrzec lekarza o następujących chorobach:

  • przewlekła patologia tkanki łącznej;
  • gruźlica;
  • przewlekłe choroby o etiologii wirusowej: HIV, WZW typu B, C, D;
  • przewlekła choroba wątroby;
  • patologie autoimmunologiczne.

Wraz z wiekiem w ciele pacjenta reakcje redoks spowalniają. Starzejące się tkanki mogą również wykazywać fałszywie dodatni wynik, a zatem starsi pacjenci otrzymują bardziej dokładne metody badawcze.

Zwróć uwagę! Przy pozytywnej reakcji Wassermana przeprowadzane jest dodatkowe badanie, które umożliwia uzyskanie dokładniejszego obrazu.

Ponownie sprawdź

Powtarzający się test na kiłę przeprowadza się z wątpliwymi wynikami badania przesiewowego. Jest wyznaczany za pomocą jednego lub dwóch krzyży - ta analiza wymaga dodatkowej weryfikacji. Badanie może dać fałszywie pozytywne wyniki w kilku przypadkach:

  • Wczesny etap choroby. Przed pojawieniem się solidnego chancrego ilość immunoglobulin w organizmie jest wystarczająco niska.
  • Późny etap choroby. Od czasu infekcji minęły ponad 2 lata, a miano przeciwciał stopniowo zaczęło spadać.

Powtórzona analiza, przeprowadzana po 2-3 tygodniach, pokazuje dokładnie, czy istnieje choroba. Jeśli po raz drugi pojawi się wynik dodatni, stosuje się dodatkowe techniki klarujące.

Testy ciążowe

Jednym z najbardziej nieoczekiwanych może być pozytywny wynik testu na kiłę u kobiet w ciąży, zwłaszcza jeśli kobieta nie zmieniła partnera. Ta sytuacja często przeraża przyszłe matki, ponieważ treponema może negatywnie wpływać na rozwój wewnątrzmaciczny dziecka.

Badania przesiewowe na ciążę wykonuje się kilka razy:

  • kiedy zostanie zarejestrowany, po 12 tygodniach;
  • początek trzeciego trymestru, po 30 tygodniach;
  • przed porodem.

Jest to ilość badań uznawanych za minimalną. Fałszywa pozytywna analiza na kiłę może przejawiać się z powodu restrukturyzacji ciała, która ma miejsce w czasie ciąży. Kiedy kobieta nosi dziecko, jej układ odpornościowy wytwarza dużą liczbę przeciwciał - ewolucyjne urządzenie chroniące dziecko w pierwszym roku życia.

Podczas ciąży zalecana jest dodatkowa analiza udoskonalenia, która charakteryzuje się większą dokładnością. Jeśli badanie kontrolne wykazuje obecność czynnika w ciele, leczenie jest obowiązkowe. Wpływ terapii na rosnący organizm jest znacznie mniejszy niż ewentualna szkoda wywołana trepanią.

Jak przygotować się do analizy?

Jednym ze sposobów uniknięcia złego wyniku jest przygotowanie do dostarczenia testów. Z powodu niewłaściwego przygotowania mogą wystąpić reakcje, które towarzyszą wytwarzaniu niespecyficznych przeciwciał, co prowadzi do pojawienia się nieprawidłowego wyniku.

  • Analizę należy przeprowadzić na czczo. Możesz używać tylko czystej wody.
  • Dzień przed pobieraniem krwi konieczne jest całkowite wyeliminowanie alkoholu - stwarza dodatkowe obciążenie dla wątroby, co może prowadzić do pojawienia się pozytywnego wyniku.
  • Zaleca się w przeddzień odmowy jedzenia tłustych i smażonych potraw, pikantnych potraw i dużej liczby przypraw.
  • Co najmniej 60 minut przed analizą zaleca się powstrzymanie się od palenia.
  • Przed pobraniem krwi z żyły, musisz odpocząć przez 10-15 minut na oddziale.
  • Kobietom nie zaleca się oddawania krwi podczas menstruacji.
  • Niemożliwe jest przeprowadzenie analizy po badaniu rentgenowskim, zabiegach fizjoterapii.
  • Zabronione jest oddawanie krwi na kiłę podczas zaostrzenia chorób zakaźnych.

Zwróć uwagę! Jeśli pacjent przyjmuje jakiekolwiek leki, powinien skonsultować się z lekarzem przed badaniem, może minąć kilka dni od przyjęcia leku i analizy.

Co powinienem zrobić, jeśli mam kiłę?

Nie martw się o podstawowe badanie przesiewowe z pozytywnymi wynikami. Kiła fałszywa jest łatwo określana przez wielokrotne badanie. Jeśli diagnoza została potwierdzona, konieczne jest podjęcie działań:

  • badanie partnera seksualnego u dermatologa;
  • badanie bliskich krewnych;
  • wdrożenie leczenia zapobiegawczego w celu zapobiegania zakażeniom u krewnych;
  • rejestracja zwolnienia lekarskiego w okresie leczenia - karta zwolnień lekarskich nie zawiera informacji o diagnozie, gwarantuje poufność;
  • pod koniec trwania kuracji wydany zostaje specjalny certyfikat - musisz mieć go przy sobie, aby uniknąć pytań o fałszywie pozytywne wyniki w ciągu najbliższych kilku miesięcy.

Dodatni wynik dla kiły nie zawsze jest wiarygodny. Dlatego nie martw się i zalecamy poczekanie na dodatkowe badania. Odpowiednie leczenie, które zostało rozpoczęte na czas, gwarantuje szybki powrót do zdrowia z minimalnymi efektami resztkowymi.

Czy są możliwe błędy PCR? Fałszywie ujemne i fałszywie dodatnie wyniki PCR

Udostępnij nowe informacje w:

Aby otrzymać fałszywe wyniki w diagnostyce PCR - Zarówno fałszywie dodatnie, jak i fałszywie ujemne - mogą wpływać na różne okoliczności.

Zastosowanie metody reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) wymaga ścisłego przestrzegania wszystkich etapy analizy, począwszy od analizy próbkowanialekarz przed interpretacją wyników analizy. Jak informacyjna analiza PCR zależy od wielu okoliczności.

  • Fałszywy pozytywny wynik analizy może wynikać z dostania się do materiału (wymaz lub skrobanie cewki moczowej) krew.
  • Podobne fałszywie dodatnie wyniki analizy PCR uzyskano ze względu na brak komórek nabłonka w materiale, ale zawartość dużej ilości całkowicie nieinformatywnego śluzu.
  • Na otrzymanie wyników analizy fałszywego DNA ma wpływ niewłaściwy transport i przechowywanie uzyskanych próbek. Infekcja DNA w tym przypadku może zostać zniszczona, aw konsekwencji - wynik fałszywie ujemny.
  • Zaburzenia sterylności podczas diagnostyki PCR są kolejnym powodem fałszywie dodatniego PCR. W zebranym materiale pacjenta obce bakterie mogą dostać się z rąk lekarza, od odzieży, ze szkła lub zanieczyszczonych narzędzi, do naczyń wielokrotnego użytku. W rezultacie znaleziono "nieistniejącą" infekcję.
  • Nieodpowiednie odczynniki. Nieograniczone i przestarzałe laboratorium, w którym lekarze "przymykają oczy" na niezdatność odczynników, to kolejny poważny powód niewiarygodnej diagnozy. Oczywiście jest to bardzo tanie diagnostyka laboratoryjna, ale nie może, ale wpływać na jego wyniki.

Udostępniaj nowe informacje znajomym i znajomym w:

Twoje pytania

Pytanie: Jak dokładna jest diagnoza PCR?

Jaka jest dokładność diagnostyki PCR?


Dokładność PCR (reakcja łańcuchowa polimerazy) diagnoza w niektórych infekcjach wynosi od 99 do 100 procent.
Jest to niezwykle rzadka reakcja PCR, która daje wyniki fałszywie ujemne iw praktyce nie daje wyników fałszywie pozytywnych. Fałszywie ujemny wynik ma miejsce, gdy analiza wykazuje brak patogennego mikroorganizmu (źródło infekcji), a kiedy w rzeczywistości jest.
Może się to zdarzyć, gdy:

  • Materiał biologiczny jest nieprawidłowo wybrany. Na przykład, gdy infekcja wirusem cytomegalii bada mocz (nie rozmaz z gardła lub krwi) lub diagnostyka infekcja ośrodkowego układu nerwowego (centralny układ nerwowy) zamiast płynu mózgowo-rdzeniowego wykorzystuje się krew.
  • Nie przestrzegano zasad zbierania biomateriału. Jeśli ktoś poddał się antybiotykoterapii podczas testów PCR, wziął leki uroseptyczne i przeciwwirusowe. Podobnie, testy fałszywie ujemne mogą być, jeśli przed dostarczeniem wymazu lub moczu pacjent oddał mocz, uprawiał seks w przeddzień lub przyjmował leki w postaci czopków dopochwowychświece).
  • Analizowane jest źródło infekcji, które w trakcie aktywności życiowej ulega zmianie. Sercem każdego mikroorganizmu jest zdolność do zmiany. Niektóre wirusy mogą uzyskać zmienność na poziomie DNA (kwas deoksyrybonukleinowy). Na przykład wirus grypy ma dużą zdolność do "mutowania" i zmiany jego informacji genetycznej. Zatem PCR nie może wykryć źródła infekcji, ponieważ genom (agregat genów) mogły ulec zmianie.

Fałszywie dodatni wynik (analiza wykazuje obecność infekcji, gdy jej nie ma) nie jest typowy dla diagnostyki PCR i występuje tylko w tych przypadkach, gdy infekcja jest już "martwa", ale jej martwe komórki krążą w organizmie. Niezdolność do odróżnienia "martwej" infekcji od czynnej (żywy) infekcja jest jedną z wad metody PCR. W przypadku, gdy dana osoba miała już pewną infekcję (choroba była leczona i zabijana przez środki przeciwbakteryjne lub antywirusowe), analiza PCR nadal da pozytywny wynik patogennemu drobnoustrojowi, nawet jeśli jest już "martwy".

Analiza PCR, diagnostyka infekcji metodą PCR

Na szczęście żyjemy w zupełnie innym czasie, kiedy możliwości diagnozy nie są nieograniczone, ale są bardzo duże. Teraz, w celu ustalenia wyników ogólnej analizy krwi, lekarze laboratoryjne nie muszą spędzać tyle czasu, wydać je na mikroskopem, a następnie wypełnić formularz ostrożnie; wystarczy umieścić próbówkę w specjalnym urządzeniu na kilka sekund, co samo w sobie da pożądane wyniki w postaci drukowanej. Tak więc z innymi badaniami. Na przykład teraz każda infekcja, nawet wyciek potajemnie, może zostać zidentyfikowana przez "skopiowanie" próbki materiału z kopiami jego DNA. Ta niesamowita technika, która stała się dla nas całkiem zwyczajna, nazywa się PCR, co oznacza "reakcję łańcuchową polimerazy".

Podstawa metody

Wyjaśnienie istoty diagnostyki PCR jest dość proste, choć złożone procesy zachodzą podczas jej wykonywania.

Metoda opiera się na identyfikacji DNA czynnika zakaźnego, bez względu na to, czy jest to wirus, bakteria, czy najprostszy. Jeśli materiał pacjenta zawiera przynajmniej minimalną ilość DNA, przynajmniej ślad obecności w nim drobnoustroju, test da wynik pozytywny.

Do analizy PCR z próbek krwi (lub plamy i skrobania lub czegoś innego) umieszcza się w specjalnym urządzeniu, gdzie dodaje się do enzymów o zdolności do wpływania na materiał genetyczny. Enzymy te "znajdują" fragmenty DNA i reprodukują na ich podstawie dużą liczbę dokładnych kopii. Na podstawie jednego fragmentu można stworzyć tysiące analogów, co zwiększa całkowitą objętość materiału genetycznego patogena w próbce.

Następnie DNA jest wykrywane przez specjalne próbki mające na celu wykrywanie antygenów różnych patogenów.

Metodą PCR może nie tylko dać odpowiedź na pytanie, czy dana osoba ma konkretnej choroby, ale w niektórych przypadkach oszacować w przybliżeniu określić, ile zarazki są w ciele pacjenta (ta odzwierciedla nasilenie i stadium choroby - zaostrzenia lub remisji).

Diagnozowanie, które infekcje są możliwe przez PCR?

Jeśli to konieczne, można wykonać diagnostykę PCR kilkudziesięciu różnych infekcji, ale najbardziej "istotne" są niektóre z nich wymienionych poniżej. Szczególnie duże znaczenie PCR staje gdy ujawni ukryte infekcje, w którym bakterie uwięzione w ciele i rozwijające się w nim, nie powodują żadnych objawów, ale szkodliwe dla zdrowia i powodować pojawienie się powikłań. Ponieważ w większości przypadków infekcja utajona różni się od infekcji seksualnej, reakcja PCR jest najbardziej pożądana w definicji chorób przenoszonych drogą płciową.

Charakterystyczne jest, że niektóre choroby mogą być natychmiast spowodowane przez kilka gatunków jednego rodzaju drobnoustrojów lub kilka szczepów tego samego gatunku. W takich przypadkach PCR jest w stanie określić w najdrobniejszych szczegółach, który patogen wywołał proces patologiczny.

Tak więc, metoda reakcji łańcuchowej polimerazy jest stosowana do diagnozy następujących chorób i kiedy wykrywane są następujące patogeny:

- wirusowe zapalenie wątroby (wirus zapalenia wątroby typu B i C);

-mykoplazmoza (Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium);

- ureaplasmosis (Ureaplasma urealiticum, Ureaplasma parvum);

- Chlamydia (Chlamydia trachomatis);

- Candidiasis (Candida albicans);

- rzęsistkowica (Trichomonas vaginalis);

- gruźlica (Mycobacterium tuberculosis);

- opryszczka (wirusy opryszczki pospolitej o 1,2 rodzaju);

-Helicobacter pylori (bakteria związana z przewlekłym zapaleniem żołądka i chorobą wrzodową);

- ludzki wirus brodawczaka, w tym onkogenne serotypy;

- ludzki wirus niedoboru odporności;

PCR i wyniki fałszywie dodatnie

Metoda reakcji łańcuchowej polimerazy jest bardzo precyzyjna, ale jest to nie tylko jej najważniejsza zaleta, ale także problem. Faktem jest, że czasami z PTSR są fałszywie dodatnie wyniki.

Z tego powodu w niektórych chorobach nie ma sensu przeprowadzanie diagnostyki PCR. Na przykład występuje takie zaburzenie, jak gardnerellez lub bakteryjne zapalenie pochwy. Kiedy występuje u kobiet, dochodzi do naruszenia mikroflory pochwy, zbyt aktywnej reprodukcji niektórych składników flory, a mianowicie bakterii-gardnerell. Jeśli bakterie te są nieliczne, ich obecność nie wywołuje objawów, ale jeśli są obecne w zbyt dużych ilościach, pojawia się zapalenie, pojawia się świąd i wydzielina.

Jeśli sprawisz, że zdrowa kobieta i pacjent z waginozą będą klasyczną analizą PCR, to w obu przypadkach wynik pozytywny. Badanie nie "bierze pod uwagę" tego, że gardnerelles mogą być iw normie, w każdym razie uznaje je za "wrogów". W takich przypadkach odwołujemy się do analizy ilościowej, którą omówimy poniżej.

Podobnie, czasami określa się fałszywie dodatnią reakcję PCR, jeśli zamiast "szkodliwych" gatunków drobnoustrojów pewnego rodzaju są w materiale "nieszkodliwe".

Pomimo pewnego prawdopodobieństwa wyników fałszywych, diagnostyka PCR jest bardzo dokładna; co więcej, z biegiem czasu jego technologia jest ulepszana, więc w przyszłości być może problem fałszywych pozytywnych wyników może zostać zapomniany. Ale jak dotąd, niestety, należy pamiętać o możliwości ich uzyskania.

Mamy nadzieję, że informacje te nie doprowadzą do utraty zaufania do metodologii. Ogólnie jest dużo bardziej niezawodny niż wiele innych testów. W szczególności jest bardzo mało prawdopodobne, aby dawały wyniki fałszywie ujemne, które są bardzo charakterystyczne dla nie mniej popularnej analizy ELISA. Niemniej jednak, świadomie Cary Mullis, "odkrywca" PCR, stał się właścicielem nagrody Nobla...

Analiza PCR

Do przeprowadzenia diagnostyki PCR można stosować różne rodzaje materiałów, ale w pewnych chorobach z reguły pobiera się próbki, w których najłatwiej jest wykryć patogen.

Zakażenia wnikając we krwi (na przykład, wirusowe zapalenie wątroby lub HIV) wymaga pobierania krwi, większość infekcji narządów żyjących w odpowiednich miejscach określonych w badaniu z pochwy, kanał szyjki macicy lub cewki moczowej. Choroby przenoszone drogą płciową wewnątrzkomórkowe patogeny, takie jak Mycoplasma zdefiniowane w badaniu zeskrobin z narządów rodnych. Czasami do diagnozy można pobrać mocz, śliny, wymaz z gardła.

Wszelkie materiały są pobierane w kolejności określonej przez standardowe zasady.

Krew pobierana jest z żyły na pusty żołądek, w dniu poprzedzającym ogrodzenie należy odrzucić spożywanie tłustych pokarmów i alergizujących pokarmów. Pierwszego porannego moczu zbiera się w sterylnych pojemnikach po wstępnej toalecie krocza i jest kierowany do laboratorium. Aby pobrać rozmaz z pochwy, pacjent znajduje się na fotelu ginekologicznym, a specjalista za pomocą sterylnego przyrządu pobiera próbkę z pożądanego obszaru. U mężczyzn, wymaz lub skrobanie na STD jest pobierane z zewnątrz cewki moczowej. Mówiąc, jak się okazuje rozmaz z gardła, widocznie nie jest to konieczne - w dzieciństwie każda osoba przechodziła lub odbyła tę prostą procedurę kilka razy.

Po fazie pobierania próbek pacjent może nie myśleć o swoim przyszłym losie: próbka wraz ze wszystkimi niezbędnymi zasadami przechowywania i transportu zostanie dostarczona do laboratorium, gdzie następnie zostanie zbadana. Niestety, PCR nie może być nazwany szybką metodą diagnozy, produkcja wyników może trwać kilka dni, średnio - tydzień. Jednak nie jest to limit maksymalnego czasu trwania wyników analizy. Na przykład, aby przeprowadzić badanie bakteriologiczne na gruźlicę, trzeba poczekać miesiąc - kije Kocha nie mogą rosnąć szybciej niż kolonia.

Dekodowanie wyników PCR

W najprostszych przypadkach wyniki analizy nie muszą być rozważane przez długi czas, ponieważ są wydawane w bardzo zrozumiały sposób: wpisy są "negatywne" lub "pozytywne" na wydrukowanym formularzu. Jeśli wynik PCR jest ujemny, pacjent może być pewien, że nie ma żadnych oznak infekcji w jego ciele, których szukanie zostało przesłane do analizy. Pozytywny wynik testu PCR może wskazywać na sytuację odwrotną, chociaż, jak wspomniano powyżej, w rzadkich przypadkach mogą wystąpić wyniki fałszywie dodatnie.

Istnieje rodzaj reakcji łańcuchowej polimerazy, na przykład PCR w czasie rzeczywistym. Ta analiza określa nie tylko obecność materiału genetycznego patogenu w próbce, ale także jej zawartość ilościową, co pozwala na wyciągnięcie jeszcze dokładniejszych wniosków na temat istniejącej choroby. W tym przypadku wyniki badania podano w liczbach. Pacjent nie zawsze jest w stanie prawidłowo je odszyfrować, więc ostateczne wnioski o tym, czy dana osoba cierpi na infekcję, powinny zostać złożone przez lekarza, w zależności od miana DNA w próbce materiału.

Obecnie analiza PCR jest jednym z najbardziej wiarygodnych testów laboratoryjnych, które może wykonać tylko pacjent. Nie oznacza to jednak, że od tej pory, jeśli podejrzewasz jakąkolwiek infekcję, powinieneś stosować się tylko do tego typu diagnozy. W przypadku niektórych chorób istnieją preferowane metody badań, dlatego lepiej najpierw skonsultować się ze specjalistą, aby zasugerować, która analiza jest najlepiej stosowana w każdym przypadku.