Analiza krwi na tms co to jest

Diety

Tandemowa spektrometria masowa (TMS) jest jedną z nowoczesnych metod analizy złożonej, która jest szeroko stosowana do różnych celów naukowych i praktycznych. Metoda ta pozwala na analizę kilkuset związków w mikro-materiałach biologicznych.

Gdzie jest stosowana ta metoda?

W światowej praktyce opieki zdrowotnej ta metoda jest stosowana do masowego badania noworodków pod kątem dziedzicznych chorób metabolicznych (NBD). W miejscu zaschniętej krwi można określić aminokwasy (w tym fenyloalaninę) i acylokarnityny. Ilościowe określenie tych substancji, pozwala wykluczyć kilkadziesiąt chorób genetycznych związanych z różnymi klasami NbO (zaburzenia metabolizmu aminokwasów, wady kwasów organicznych i kwasów tłuszczowych mitochondrialnej P-oksydacji). Według zagranicznych danych literackich ich łączna częstotliwość wynosi 1: 2000 żywych noworodków. Poprzednio, dla celów diagnostyki tych zaburzeń wymaga dużej ilości materiału biologicznego w kilku badaniach (analiza aminokwasów, oznaczanie do chromatografii gazowej i spektrometrii widma acylokarnityny), które wymagane znaczne koszty materiałów i robocizny. TMS pozwala na ilościowe określenie wszystkich tych związków podczas jednej analizy!

Jakie choroby można wykryć za pomocą tej metody?

Niestety, jeden uniwersalny, bardzo czuły i szczegółowy test do diagnozy wszystkich znanych NBO jeszcze nie istnieje, ale technologie mające na celu zidentyfikowanie kilkudziesięciu, a nawet setek chorób w jednej analizie już stają się rzeczywistością. Do takich metod stosuje się TMS. Metoda ta pozwala na identyfikację z wysoką niezawodnością około 40 dziedzicznych zaburzeń metabolicznych aminokwasów, kwasów organicznych i wad mitochondrialnego beta-utleniania kwasów tłuszczowych. Większość tych chorób występuje w okresie noworodków. Lista chorób, które można zdiagnozować za pomocą tej technologii, znajduje się w sekcji analizy http://labnbo.ru/prajs-list

Dlaczego konieczne jest jak najszybsze zdiagnozowanie chorób metabolicznych?

Wielu lekarzy błędnie uważa, że ​​NBO są tak rzadkie, że konieczne jest wykluczenie ich tylko na ostatnim miejscu, a bardzo często prawidłową diagnozę ustalono już w późniejszym terminie lub choroba nie jest w ogóle diagnozowana.

Jednak już ponad 150 form NBO, dla których opracowano metody skutecznej terapii i jak wiele zależy od życia i zdrowia pacjenta, od tego, jak szybko i prawidłowo ustala się rozpoznanie, jest już znane. W przypadku 20 chorób, które można zdiagnozować za pomocą TMS, opracowano specjalne leczenie. Dostarczona w czasie diagnoza - uratowane życie i zdrowie pacjenta!

Zasady pobierania próbek krwi

Krew pobierana jest na standardowej karcie filtrującej (nr 903), która służy do badania noworodków w PKU. Krew może być jak kapilara (z palca, pięty) i żylna. Konieczne jest zaimpregnowanie wybranego obszaru na filtrze! Na karcie filtra należy jednoznacznie wskazać nazwę, kto i skąd wysłano pacjenta, datę urodzenia oraz numer telefonu lekarza prowadzącego. Próbkę suszy się w ciągu 2-3 godzin na powietrzu. Wskazane jest, aby dołączyć ekstrakt z historii medycznej.

Przykład prawidłowego pobrania próbek krwi:

Przykłady nieprawidłowego pobrania próbek krwi:

Mnóstwo małych plamek

Próbka nie została wysuszona do końca, powodując rozmycie próbki podczas transportu.

Bibuła filtracyjna była słabo zaimpregnowana krwią.

Przydatne linki:

(NCBI) - zasób informacji na krajowym Biologii Molekularnej, założona w 1988 roku bazy danych PubMed zawiera więcej niż 15.000.000 artykuły w różnych czasopismach biomedycznych (w języku angielskim).

Katalog ludzkich genów i chorób genetycznych, stworzony przez dr V.A. McKusick i jego koledzy (po angielsku).

(SSIEM) - Towarzystwo badań dziedzicznych chorób metabolicznych (wrodzone błędy metaboliczne).

Instytucja naukowa Federalnego Budżetu Państwa "Medyczne Centrum Nauk Genetycznych"

Portal informacyjny o rzadkich chorobach, możliwościach ich leczenia i diagnostyce dla pacjentów z rzadkimi chorobami

Ogólnorosyjskie Towarzystwo Rzadkich Chorób powstało w 2012 roku z inicjatywy pacjentów, członków ich rodzin i ekspertów. Do tej pory VOZ zrzesza ponad 400 pacjentów z 47 regionów Federacji Rosyjskiej z 63 rzadkimi chorobami.

Analiza krwi na tms co to jest

Z biegiem lat przeprowadzono generalnie badania przesiewowe testy, specyficzne dla każdej pojedynczej choroby. Na przykład badania przesiewowe na PKU opierały się na ocenie mikrobiologicznej lub chemicznej rosnącej fenyloalaniny.

Ta sytuacja całkowicie zmieniła się w ciągu ostatniego dekadę wraz z nadejściem technologii tandemowej spektrometrii mas (TMS). Analiza spektrometrii masowej tandem (TMS), nie tylko szybko i dokładnie wykrywać podwyższone miejsce fenyloalaniny krwi u noworodków z mniejszą liczbą fałszywie dodatnich reakcji w porównaniu do starszych sposobów, ale również pozwala na wykrycie jednocześnie kilkadziesiąt innych zaburzeń biochemicznych.

Niektóre z nich zostały już sprawdzone indywidualne testy. Na przykład, wielu stanów stosować specjalne testy do wykrywania zwiększonej metioninę, aby wykryć w tandemie ze spektrometrią masową (TMS) również ma niezawodnej metody dla niektórych chorób odpowiednie kryteria skriningu przesiewowego onatalnogo ale nie ma niezawodne badanie wcześniej.

Na przykład Niedobór MCAD - zaburzenia utlenianie kwasów tłuszczowych zwykle bezobjawowe, ale klinicznie wykrywalnych, kiedy pacjent jest zwiększonego katabolizmu. Wykrycie niedoboru MCAD przy urodzeniu może okazać się niezbędna jako chore dzieci mają bardzo wysokie ryzyko zagrażającej życiu hipoglikemii we wczesnym dzieciństwie z katabolicznych warunkach spowodowanych chorobami między kurrentnymi, takich jak zakażenie wirusowe.

Prawie jedna czwarta dzieci z niezdiagnozowany niedobór MCAD umrzeć w pierwszym epizodzie hipoglikemii. Przy odpowiednim leczeniu można zadbać o zaburzenie metaboliczne. Niedobór MCAD gdy głównym celem badań przesiewowych - ostrzeżenie dla rodziców i lekarzy na temat ryzyka dekompensacji metabolicznej, jak dzieci między ataki prawie zdrowe i nie wymagają leczenia codziennego, z wyjątkiem wyjątków długotrwałe głodzenie.

Niemniej jednak korzystanie z tandemowa spektrometria masowa (TMS) w badaniach przesiewowych noworodków pozostaje wątpliwa. Ponadto, aby zapewnić szybkie badanie wielu zaburzeń, noworodków, dla których już miejsce lub może być uzasadniony, spektrometria masowa tandemowego (TMS) także opisano niemowlętom wrodzonych błędów metabolizmu, takich jak metylomalonowego acidemia, zwykle nie są włączone do badań przesiewowych ze względu na ich rzadkość i trudności w dostarczaniu końcowa terapia, która zapobiega progresywnemu pogorszeniu neurologicznemu.

Choroby wykryto za pomocą tandemowej spektrometrii mas

I. Aminoacidemia:
- PKK
- Choroba moczu z zapachem syropu klonowego
- Homocystynuria
- Cytrulinemia
- Arginina-kwas bursztynowy
- Tyrozynemia typu I

II. Acidemia organiczna:
- Kwas propionowy
- Kwas acetylometylowy
- Kwasowa Isovaleric
- Izolowana 3-metylo-krotonyloglikemia
- Kwasica glutarowa (typ I)
- Mitochondrialny niedobór acetoacetyl-coA-tiolazy
- Kwas hydroksymetyloglutarowy
- Nieadekwatność wielu karboksylaz CoA

III. Zaburzenia utleniania kwasów tłuszczowych:
- Niewystarczające SCAD
- Niedobór hydroksy-SCAD
- Niewystarczające MCAD
- Niewystarczający VLCAD
- Brak LCAD i niedobór trójfunkcyjnego białka
- Kwasica glutarna typu II
- Niewystarczalność karnityno-palmitoilotransferazy II

Tandemowa spektrometria masowa (TMS) może również identyfikować nieprawidłowe metabolity o niepewnej wartości zdrowotnej. Na przykład niedobór SCAD jest inną chorobą związaną z utlenianiem kwasów tłuszczowych, najczęściej bezobjawową, chociaż niektórzy pacjenci mogą mieć trudności związane z hipoglikemią epizodyczną. Zatem wartość predykcyjna wyniku dodatniego analizy tandemowej spektrometrii masowej (TMS) dla objawowej SCAD jest prawdopodobnie bardzo niska.

Czy przewaga wykrywania przeważa Niewystarczalność SCAD negatywny wpływ testu, powodujący nieuzasadniony lęk rodziców, dla większości noworodków z dodatnim wynikiem testu, którzy nigdy nie wykazywali objawów klinicznych? Zatem nie każda choroba wykrywana za pomocą metody tandemowej spektrometrii masowej (TMS) spełnia kryteria przesiewowe noworodków.

Dlatego niektórzy eksperci system opieki zdrowotnej pokazują, że rodzice i lekarze muszą być zgłaszane tylko o odchyleniach w metabolitów z udowodnionych korzyści klinicznej. Inny adwokat wykorzystanie wszystkich informacji dostarczonych przez tandem spektrometrii masowej (TMS) i oferują do informowania lekarzy i rodziców wszystkie nienormalne metabolity, nie ważne jak dobry kryteria choroby odpowiadają standardowym noworodków. W przyszłości możesz dokładnie monitorować pacjentów z anomaliami o nieznanym znaczeniu. Z tych wszystkich powodów, stosowanie tandemowej spektrometrii masowej (TMS) dla przesiewowe noworodków i pozostaje przedmiotem dyskusji.

Dla badanie populacji w okresie przedporodowym zwykle stosuje się dwa testy: analizę chromosomalną u starszych kobiet i AFP w surowicy matki lub potrójny test na DNT i aneuploidię chromosomową.

Jeśli ciąża zagrożona z uwagi yn - inwazyjne procedury diagnostyki prenatalnej aneuploidii chromosomowych związane z wiekiem matki, należy również dodatkową kontrolę, na przykład określenia poziomu AFP w płynie owodniowym wyszukiwania całego genomu hybrydyzacji porównawczy niebezpiecznych submikroskopowe delecje, mutacje przesiewowe dla mukowiscydozy i innych powszechnych dolegliwości.

Analiza krwi na tms co to jest

Tandemowa spektrometria masowa jest jedną z nowoczesnych metod analizy złożonej, która jest szeroko stosowana do różnych celów naukowych i praktycznych. Metoda ta pozwala na analizę kilkuset związków w mikro-materiałach biologicznych. W światowej praktyce zdrowotnej metoda ta jest stosowana do masowego badania noworodków pod kątem dziedzicznych chorób metabolicznych (NBD). W miejscu zaschniętej krwi można określić aminokwasy (w tym fenyloalaninę) i acylokarnityny. Ilościowe oznaczenie tych substancji pozwala na wykluczenie kilkudziesięciu dziedzicznych chorób należących do różnych klas NBO (zaburzeń metabolicznych aminokwasów, kwasów organicznych i wad mitochondrialnego b-utleniania kwasów tłuszczowych). Poprzednio, dla celów diagnostyki tych zaburzeń wymaga dużej ilości materiału biologicznego w kilku badaniach (analiza aminokwasów, oznaczanie do chromatografii gazowej i spektrometrii widma acylokarnityny), które wymagane znaczne koszty materiałów i robocizny. TMS pozwala na ilościowe określenie wszystkich tych związków podczas jednej analizy! Wrodzone zaburzenia metabolizmu aminokwasów, kwasy organiczne i defekty mitochondrialnego beta-utleniania kwasów tłuszczowych mają około 100 postaci nosologicznych, z których większość przejawia się w okresie noworodkowym. Ich częstotliwość przekracza 1: 5000 noworodków na żywo. Wielu lekarzy błędnie uważa, że ​​choroby tej grupy są tak rzadkie, że konieczne jest wykluczenie ich tylko na ostatnim miejscu, a bardzo często prawidłowa diagnoza jest ustalana już w późniejszym terminie lub choroba nie jest w ogóle diagnozowana.

Podczas analizy 52 wskaźniki (aminokwasy i acylokarnina)

Materiał do badań: kapilara krwi w suchej postaci

Przygotowanie do badania: nie

Dni przyjęć: w godzinach pracy centrum medycznego

No. НБО1, Badanie przesiewowe noworodków. "PIĄTA" (analiza spektrum aminokwasów i acylokarnityn)

  • Podobne przypadki choroby w rodzinie.
  • Przypadki nagłej śmierci dziecka w młodym wieku w rodzinie.
  • Ostre pogorszenie stanu dziecka po krótkim okresie normalnego rozwoju (okres bezobjawowy może wynosić od kilku godzin do kilku tygodni).
  • Niezwykły zapach ciała i / lub mocz ("słodki", "mysz", "gotowana kapusta", "spocone stopy" itp.).
  • Zaburzenia neurologiczne - zaburzenia psychiczne (letarg, śpiączka), różnego rodzaju napady drgawkowe, zmiany napięcia mięśniowego (niedociśnienie mięśni lub tetrapareza spastyczna).
  • Naruszenie rytmu oddychania (bradypnoe, tachypnea, bezdech).
  • Zaburzenia z innych narządów i układów (uszkodzenie wątroby, uszkodzenie wątroby, kardiomiopatia, retinopatia).
  • Zmiany parametrów laboratoryjnych krwi i moczu - anemia, neutropenia, kwasicy metabolicznej alkalozy, hipoglikemia / / hiperglikemii, zwiększenie aktywności enzymów wątrobowych i poziomu kinazy kreatynowej, ketonurii.
  • Dodatkowe rozpoznanie 37 dziedzicznych chorób metabolicznych wraz z obowiązkowym programem państwowym do wykrywania 5 chorób dziedzicznych: badania przesiewowe noworodków: "PYATOCHKA".

Interpretacja wyników badań zawiera informacje dla lekarza prowadzącego i nie jest diagnozą. Informacje z tej sekcji nie mogą być wykorzystywane do samodzielnej diagnozy i samodzielnego leczenia. Dokładną diagnozę podejmuje lekarz, wykorzystując zarówno wyniki tej ankiety, jak i niezbędne informacje z innych źródeł: anamnezę, wyniki innych badań itp.

Jednostki w laboratorium INVITRO: μmol / litr.

LABORATORIUM CHORÓB CHOROBOWYCH WYMIANY SUBSTANCJI

Wskazania do analizy TMS

Rozpoznanie kliniczne wrodzonych zaburzeń metabolicznych aminokwasów, kwasów organicznych i defektów mitochondrialnego utleniania b może stwarzać pewne trudności, ponieważ choroby te nie mają specyficznych objawów przedmiotowych i podmiotowych. Dlatego badania wszystkich pacjentów noworodków z oddziałów patologii, oddziałów intensywnej terapii dla dzieci mogą pomóc w szybkim wykrywaniu tych dziedzicznych chorób.

Wskazania do badania acylokarniny i aminokwasów za pomocą TMS to:


7. Zmiana krwi i moczu - trombocytopenia, anemia, neutropenia, metabolicznych, zasadowicy, hiperglikemię, kwasicę / podwyższonych enzymów wątrobowych i hipoglikemii / poziomu kinazy kreatynowej, ketonurii.

Testy genetyczne

Dziewczyny, my, neurolodzy, posłaliśmy do genetyki (powiedziała, że ​​porażenie mózgowe nie jest naszą diagnozą, ale zabrała je do sanatorium na leczenie). Powiedz mi, kto się z tym zmierzył, ile wynosi w przybliżeniu? Nie wiem jeszcze, do kogo zostaniemy wysłani, ale chciałbym wiedzieć, co należy przygotować, to nie jest ogólne badanie krwi...

Aplikacja mobilnaSzczęśliwa mama 4.7 Komunikacja w aplikacji jest znacznie wygodniejsza!

Nie mogę powiedzieć. wszystko może być. i wszystko jest różne na różne sposoby

Zrezygnowaliśmy z wielu rzeczy! Kariotyp 4000 rubli., TMS 4000 rubli amminokisloty moczu 4 razy (10000 rubli dla wszystkich), amminokisloty krew 4 razy, za około 10.000 rubli, 12.000 rubli zespół Dravet, mleczan wiele razy, nie tanie genetyka konsultacji i etażerka „PO- Małe rzeczy. "Badanie genetyczne nie jest tanie!

Badanie krwi w wielu sterydach: oznaczanie witalnych ludzkich hormonów na jakościowo nowym poziomie

Termin "analiza wielosteroidowa" odnosi się do określenia profilu hormonów steroidowych za pomocą metody chromatografii-spektrometrii masowej. Całość wyników tej analizy określana jest terminem "profil sterydowy". W gruncie rzeczy są to dwa równoważne terminy oznaczające to samo.

Analiza Multisteroidny - rozwinięcie domowe, technika analizy zatwierdzone i określony jako „(metoda) Pomiar stężenia wagowego od hormonów steroidowych, w próbkach krwi metodą chromatografii cieczowej -. tandemowe spektrometrii masowej Mus 08-47 / 376”, zarejestrowane w rejestrze Rosstandart pod numerem FR.1.31.2015.21875.

Obecnie analiza multiseroidalna nie znajduje się na liście testów zatwierdzonych przez Ministerstwo Zdrowia Federacji Rosyjskiej i jest przeprowadzana w ramach badań naukowych. Sami pacjenci są zmuszeni ponieść koszty tej analizy. Trwają prace mające na celu zapewnienie, że w przyszłości wydatki te będą pokrywane przez leki ubezpieczeniowe.

Ilościowe oznaczanie głównym steroidowe hormony i metabolitów w surowicy lub śliny metodą odniesienia płyn - spektrometrii masowej chromatografii gazowej-tandem (w piśmiennictwie sposób ten jest również określany jako LC-MS / MS) - procedura pracochłonne i kosztowne. Kluczową cechą sposobu jest możliwość określenia wszystkie zgłoszone analitów w jednym teście (fig. 1), ale w oparciu o ustalenia wartości analitu otrzymanego mało prawdopodobne, nie mniej niż alternatywne metody immunochemiczne.

Rysunek 1. Analizy określone podczas jednej analizy, zgodnie z procedurą

Dlaczego nazwa techniki przedstawia oznaczenie "krwi" biomateriału?

W celu natychmiastowego odróżnienia go od powszechnie znanej analizy "profilu steroidowego moczu". Należy zwrócić uwagę, że zawartość informacji analizy moczu jest bardzo różne i wymagają innego leczenia, zawartych w moczu, w dużym stopniu nieaktywne formy steroidów: siarczany, glukuronianów i hydroksylowane pochodne niepożądanego organizm i wyprowadzane z niego. Krew jest określone przez stężenie aktywnych form hormonów steroidowych, które krążą we krwi, dostarczania do całkowitej masy systemu, wprowadzać do komórek i mają wpływ na genom sygnału.

W jakich warunkach medycznych określa się profil sterydalny krwi, do którego lekarze profil sterydalny krwi pomoże w postawieniu diagnozy?

1. Wszystkie rodzaje wrodzonej dysfunkcji kory nadnerczy (VDKN). VDKN jest chorobą wrodzoną, przejawiającą się w naruszeniu biosyntezy steroidów. Jest to spowodowane naruszeniem funkcjonowania jednego z 5 enzymów kory nadnerczy. Może to być niedobór 21a-hydroksylazy (CYP21) lub 11b-hydroksylazy (CYP11B1). Tradycyjne badania przesiewowe noworodków w VDKN metodami immunologicznymi często dają fałszywie pozytywne wyniki w oznaczaniu 17-hydroksyprogesteronu. Dlatego we wszystkich spornych przypadkach konieczne jest potwierdzenie rozpoznania za pomocą LC-MS / MS [1]. Diagnoza nieklasycznych postaciach VDKN (NF VDKN) metod immunochemicznych przedstawia znaczne trudności, więc nie NF VDKN często diagnozowane przez noworodków, ale daje o sobie znać później: u młodzieży pojawia się przedwczesny wzrost włosów, trądzik; dziewczęta - hirsutyzm, zaburzenia miesiączkowania, zaburzenia rozrodczości. Do steroidów profilu gdy NF VDKN charakteryzuje się zwiększoną deoxycortisol 21- i 17-OH-progesteron, jednakże multisteroidny analizy kojarzona z testami genetycznymi jest niezwykle użyteczny w diagnozowaniu choroby.

2. Niewydolność kory nadnerczy. W tym celu przeprowadza się test stymulacji ACTH i mierzy się poziom kortyzolu, aldosteronu i 11-dezoksykortyzolu: podstawowe, 30 i 60 minut po stymulacji. Przy pierwotnej niewydolności kory nadnerczy aldosteron nie reaguje na stymulację, natomiast przy wtórnej niewydolności jest rejestrowany wzrost jego poziomu. W grupie kontrolnej poziom 11-dezoksykortyzolu zwiększa się 15-20-krotnie w odpowiedzi na stymulację ACTH, a kortyzol - około 3-krotnie [2].

3. Hipogonadyzm u mężczyzn. W celu prawidłowego rozpoznania hipogonadyzmu u mężczyzn konieczne jest ustalenie dokładnego poziomu całkowitego testosteronu (TT) za pomocą spektrometrii masowej. W badaniu obejmującym 10 000 ochotników stwierdzono, że można postawić diagnozę hipogonadyzmu, jeśli stężenie CT wynosi poniżej 12,1 nmol / L, zgodnie z danymi spektrometrii masowej [3].

4. Kontrola leczenia substytucyjnego u kobiet i mężczyzn (HRT). Dla tych pacjentów, spektrometria mas jest „złoty standard”, ponieważ pozwala to wybrać prawidłową dawkę terapeutyczną hormonu (lub stymulatora) Identyfikacja szczegółowo reakcja wszystkich metabolitów w terapii substytucyjnej i uniknąć zakłóceń związanych metod immunochemicznych [4-6].

5. Bardzo ważne jest monitorowanie poziomu hormonów steroidowych podczas ciąży oraz w ciągu jednego roku po urodzeniu dziecka. Multi-steroidy dostarczają znacznie dokładniejszych informacji o stanie androgenu w porównaniu z tradycyjnym siarczanem DHEA.

6. Ginekologia. "Wirtualizacja" (wytwarzające androgeny) guzy nadnerczy mają aktywność produkującą androgeny i powodują rozwój zespołu wirusowego u kobiet. Ustalono, że praktycznie każdy hormonalnie czynny guz jajnika może być źródłem nadmiernej produkcji androgenów i / lub estrogenów i powinien być diagnozowany przy użyciu metody tandemowej spektrometrii masowej [7].

7. Cukrzyca. Choroba ta wpływa na układ nerwowy i wpływa na stężenie neurosteroidów. LC-MS / MS umożliwia określenie stężenia neuroaktywnych steroidów w celu opracowania nowych metod leczenia nefropatii cukrzycowej [8].

8. Medycyna sportowa. Profil sterydów u sportowców we krwi i ślinie może dostarczyć ważnych informacji na temat ich stanu zdrowia, formy sportowej, kontrolować przebieg treningu ze względu na optymalny rozkład obciążeń.

Analiza wielu sterydów prawie sama w sobie nie jest żywa, biorąc pod uwagę szeroki zakres metod immunologicznych i odporność ze strony zwolenników tradycyjnych technologii. Ale za tą metodą kryje się przyszłość, już jest uznawana za najlepszego przedstawiciela nauk medycznych [9].

Co to jest ALS

Stwardnienie zanikowe boczne jest najczęstszą postacią choroby neuronu ruchowego, która jest chorobą neurodegeneracyjną, która atakuje neurony ruchowe w mózgu i rdzeniu kręgowym

Diagnoza ALS

Objawy ALS mogą być różne dla różnych osób, ponieważ choroba ma indywidualny charakter i tempo progresji.

Stwardnienie zanikowe boczne jest niezwykle trudne do zdiagnozowania z kilku powodów:

  • to rzadka choroba;
  • wczesne objawy są dość łatwe, na przykład niezdarność, niezręczność w rękach lub nieco sztywna mowa, podczas gdy wszystkie powyższe mogą być wynikiem zupełnie innych przyczyn;
  • choroba atakuje każdą osobę inaczej, nie ma wyraźnego objawu, który jest jasno określony przez ALS.

Jeśli terapeuta podejrzewa, że ​​pacjent ma ALS, powinien skierować go do neurologa. Następnie osoba może mieć serię badań diagnostycznych, które mogą być wykonywane zarówno ambulatoryjnie jak i stacjonarnie.

Badanie krwi

Badania pokażą, czy poziom kinazy kreatyninowej jest podwyższony we krwi. Enzym ten powstaje, gdy tkanka mięśniowa ulega zniszczeniu, a jego poziom może być zwiększony u osób cierpiących na ALS. Ale ten wskaźnik nie jest specyficzną oznaką ALS, ponieważ może być wskaźnikiem innych chorób.

Electroneuromyography (ENMG)

W przypadku ENMG cienkie igły są wykorzystywane do rejestrowania impulsów nerwowych w poszczególnych mięśniach. Nagrywanie odbywa się zazwyczaj z każdej kończyny i mięśni opuszkowych (gardłowych). Mięśnie, które utraciły unerwienie, znajdują się, ponieważ ich aktywność elektryczna różni się od aktywności zdrowych mięśni. Wyniki ENMG mogą różnić się od prawidłowych, nawet jeśli na konkretny mięsień jeszcze nie wpływa choroba.

W przypadku ENMG sprawdzana jest również prędkość impulsu wzdłuż włókien nerwowych. W tym celu impuls elektryczny przechodzi przez małą uszczelkę stykającą się ze skórą. Jest to bardzo ważna metoda diagnostyczna do badania.

Przezczaszkowa stymulacja magnetyczna (TMS)

Jest to nowa metoda, która może być wykonywana jednocześnie z ENMG. Jest przeznaczony do oceny stanu neuronów ruchowych mózgu. Wyniki TMS mogą pomóc w diagnozowaniu.

Rezonans magnetyczny (MRI)

MRT może wykryć uszkodzenie układu nerwowego spowodowane przez udar, chorobę Alzheimera, chorobę Parkinsona, stwardnienie rozsiane, nowotwory i uszkodzenia rdzenia kręgowego. MRT nie ujawnia żadnych konkretnych zmian w ALS, ponieważ szkody spowodowane przez tę chorobę nie są odzwierciedlone na zdjęciach. Ta metoda badawcza służy do wykluczania chorób z objawami podobnymi do ALS.

Inne metody

Neurolog może zdecydować o wykonaniu dodatkowych badań, takich jak nakłucie lędźwiowe lub biopsja mięśnia, jeśli coś wskazuje na ich potrzebę. Ale te badania nie zawsze są stosowane w diagnozowaniu ALS.

Zastosowanie tandemu
spektrometria masowa (HPLC-MSMS)
w diagnozie klinicznej

Spektrometria masowa to perspektywa rozwoju chemii klinicznej, przyszłości, w której rewolucja w diagnostyce klinicznej doprowadzi do powszechnego stosowania spektrometrii mas.
(Michael Ulerich, Wydział Chemii Klinicznej, George August University, Goettingen, Niemcy)

Według badań opublikowanych w badaniach Recenzje biochemik, stosowania wysokosprawnej chromatografii cieczowej sprzężonej ze spektrometrią masową tandemowego (HPLC-MS / MS) w laboratoriach klinicznych ogromnie wzrosła w ciągu ostatnich 10-12 lat. Autorzy zauważają, że analiza specyficzność metodą HPLC-MS / MS są znacznie lepsze metody immunologiczne i klasycznej wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC) do analizy cząsteczek o niskiej masie cząsteczkowej i ma znacznie większą wydajność w porównaniu ze spektrometrią chromatografii masowej (GC-MS). Popularność tej metody w rutynowych analizach klinicznych jest teraz wyjaśniona przez unikalne możliwości tej metody.

    Główne zalety metody HPLC-MS / MS to:

  • Możliwość dokładnej ilościowej analizy małych cząsteczek;
  • Jednoczesna analiza zestawu docelowych związków;
  • Unikalna specyficzność;
  • Analiza wysokiej prędkości.
  • W ostatnich latach wiele uwagi poświęcono czasowi analizy, a co za tym idzie zwiększeniu wydajności laboratorium. Znaczne zmniejszenie czasu analizy było możliwe dzięki zastosowaniu mniejszych kolumny do celów analitycznych HPLC / MS / MS, w tym samym czasie znacznie zwiększyć specyficzność testu. Zastosowanie jonizacji ciśnieniem atmosferycznym (API), w tandemie z potrójnym kwadrupolowym spektrometrem masowym i ulepszonej chromatografii cieczowej i związane z nimi metody przygotowania próbek powodowało HPLC-MS / MS w pierwszych rzędach nowoczesnych metod analitycznych do badań klinicznych.

      Główne zastosowania HPLC / MS / MS w medycynie klinicznej:

  • Uzyskanie pełnego profilu metabolizmu steroidów (panele), puryn i pirymidyn oraz innych związków,
    badania przesiewowe noworodków pod kątem wrodzonych błędów metabolicznych (wykrycie kilkudziesięciu chorób dla jednej analizy);
  • Monitorowanie leków - leki immunosupresyjne, przeciwdrgawkowe, przeciwretrowirusowe, przeciwzakrzepowe i dowolne inne - niezależnie od dostępności zestawów producenta. Nie musisz kupować drogich zestawów dla każdej substancji - możesz rozwijać własne metody;
  • Toksykologia kliniczna - analiza ponad 500 związków narkotycznych i ich metabolitów w jednej analizie, bez analizy potwierdzającej
    proteomika i metabolomika.
  • Ponadto, HPLC IUMI używane do skriningu oligosaharidove moczu sulfatide dlinotsepochechnyh kwasy tłuszczowe dlinotsepochechnyh kwasów żółciowych, kwasu metylomalonowego studia porfirii przesiewowych pacjentów z zaburzeniami metabolizmu puryny i pirymidyny.

    Przykłady chromatografii cieczowej
    w połączeniu z tandemową spektrometrią mas w analizach klinicznych.

    Badanie noworodków: Pierwszym przykładem masowego zastosowania HPLC-MS / MS w diagnozie klinicznej było badanie wrodzonych błędów metabolicznych u noworodków. Obecnie w krajach rozwiniętych jest to rutynowa metoda obejmująca ponad 30 różnych chorób, w tym acetaldehyd, aminokwasy, defekty utleniania kwasów tłuszczowych. Należy zwrócić szczególną uwagę na badania wad wrodzonych, które mogą prowadzić do poważnych problemów, jeśli nie zostaną podjęte natychmiastowe działania (np. Powiększenie serca, wątroby lub obrzęk mózgu). Zaletą stosowania HPLC-MS / MS do badań przesiewowych noworodków jest możliwość jednoczesnej analizy wszystkich aminokwasów i acylokarnin w szybkiej, niedrogiej i wysoce specyficznej metodzie.

    Monitorowanie leczenia produktów leczniczych: Opracowanie i wdrożenie immunosupresyjnego syrolimusa (rapamycyny) w celu zapobiegania odrzuceniu narządu po przeszczepie było jedną z głównych zachęt do wprowadzenia HPLC-MS / MS do laboratoriów klinicznych. Nowoczesna metoda HPLC-MS / MS pozwala na jednoczesne oznaczanie takrolimusu, syrolimusa, cyklosporyny, ewerolimusu i kwasu mykofenowego.

    HPLC-MS / MS stosuje się również do analizy leków cytotoksycznych, przeciwretrowirusowych, trójpierścieniowych leków przeciwdepresyjnych, leków przeciwdrgawkowych i innych leków wymagających indywidualnej dawki.

    Metoda HPLC-MSMS umożliwia rozdzielenie i oznaczenie ilościowe enancjomerów R i S warfaryny w zakresie stężeń 0,1-500 ng / ml.

    Substancje narkotyczne i przeciwbólowe: HPLC-MS / MS jest szeroko stosowana do analizy tych związków ze względu na prostotę przygotowania próbki i krótki czas analizy. Obecnie metoda ta jest wykorzystywana w laboratoriach klinicznych do badań przesiewowych pod kątem obecności szerokiego zakresu substancji odurzających. Unikalna specyficzność i czułość metody pozwala na równoczesną analizę ponad 500 związków różnych klas w jednej próbce przy minimalnym przygotowaniu próbki. Zatem w przypadku analizy moczu proste rozcieńczenie próbki wynosi 50-100 razy. Podczas analizy włosów zamiast wiązki 100-200 włosów wystarczy jeden włos, aby można było rzetelnie wykryć fakty dotyczące konsumpcji narkotyków.

    Endokrynologia i analiza steroidów: HPLC-MS / MS jest szeroko stosowana w wielu laboratoriach endokrynologicznych do analizy steroidów - testosteronu, kortyzolu, aldosteronu, progesteronu, estriolu i wielu innych.

    Coraz więcej laboratoriów zaczyna stosować HPLC-MS / MS w celu określenia poziomu witaminy D3 i D2 we krwi.

    I. Oznaczanie steroidów (profil sterydowy).

    Laboratoria w szpitalach i klinikach mają obecnie możliwość jednoczesnego określenia kilku sterydów za pomocą HPLC / MS / MS. Nie wymaga to dużej objętości próbki, co jest szczególnie ważne przy analizie próbek dla dzieci.

      Przypadki, w których wskazane jest zdefiniowanie kilku (profilowanie) sterydów:

  • Wrodzony przerost nadnerczy (wrodzony przerost nadnerczy, CAH) jest wrodzoną wadą biosyntezy steroidów. Jest to dziedziczna grupa chorób spowodowanych nieprawidłową aktywnością enzymów kory nadnerczy, co prowadzi do zmniejszenia produkcji kortyzolu. W celu wiarygodnego rozpoznania SAN zaleca się oznaczanie kortyzolu, androstendionu i 17-hydroksyprogesteronu. HPLC / MS / MS umożliwia dokładną kwantyfikację wszystkich trzech steroidów w jednym teście ze 100% pewnością.
  • Rutynowe badania przesiewowe noworodków za pomocą testów immunologicznych charakteryzują się wysokim poziomem dodatnich i fałszywie ujemnych wyników. Określenie nie tylko kortyzolu za pomocą HPLC / MS / MS, ale także aldosteronu i 11-dezoksykortyzolu umożliwia odróżnienie pierwotnej niewydolności kory nadnerczy od wtórnej.
  • HPLC / MS / MS umożliwia oznaczanie sterydów w zapaleniu gruczołu krokowego i przewlekłym zespole bólowym miednicy.
  • HPLC-MS / MS pozwala określić profil sterydów i określić przyczyny przedwczesnego dojrzewania u kory nadnerczy u małych dzieci. Stwierdzono, że stężenia testosteronu, androstendionu, dehydroepiandrosteronu (DHEA) i jego siarczanu u tych dzieci były nieco wyższe niż u starszych dzieci z grupy kontrolnej.
  • Surowica palaczy, biernych palaczy i osób niepalących, są analizowane na obecność 15 hormonów steroidowych i tarczycy na badanie zależności pomiędzy pacjentów narażonych na dym, a stężenie hormonów.
  • HPLC / MS / MS stosuje się w profilowaniu niektórych żeńskich hormonów steroidowych w moczu.
  • Stosując HPLC / MS / MS, oszacowano stężenia neuroaktywnych hormonów, aby zapobiec neuropatii cukrzycowej.
  • II. Oznaczanie hormonów tarczycy

    Rutynowych metod oznaczania hormonów tarczycy są zwykle oparte na radioimmunologicznym, która jest kosztowna i pozwala na definiowanie T3 i T4, która może tylko ograniczyć możliwość identyfikacji i pełnej regulacji funkcji tarczycy.

    • Obecnie za pomocą HPLC IUMI jednoczesne analizy przeprowadzonej w pięciu próbkach surowicy hormon tarczycy, w tym tyroksyny (T4), 3,3”, 5-trijodotyroniny (T3), 3,3', 5 '(rT3), +3, 3'diiodotironin (3,3'-T2), i 3,5-diiodotironin (3,5-T2) o stężeniu w zakresie 1 -500 ng / ml.
    • Metodę HPLC / MS / MS stosuje się również do analizy składu hormonalnego pacjentów poddanych leczeniu tarczycy. Stężenie tyroksyny są ustalonych poziomów (T4), trijodotyroniny (T3) z wolnej T4 i hormon tyreotropowy (TSH) po zabiegu. Stwierdzono, że metoda HPLC / MS / MS jest doskonałym sposobem ustalenia zależności między stężeniem TSH a stężeniem hormonów tarczycy.
    • Do oznaczenia tyroksyny (T4) w ludzkiej ślinie i surowicy zastosowano metodę HPLC / MS / MS. Metoda charakteryzuje się wysoką powtarzalnością, dokładnością i granicą wykrywania wynoszącą 25 pg / ml. Badania wykazały, że istnieje zależność diagnostyczna w stężeniach T4 w ślinie między pacjentami z eutyreozą a pacjentami z chorobą Gravesa-Basedowa.

    Metoda HPLC / MS / MS ma obecnie czułość, swoistość i dokładność niezbędną do niezawodnego określenia wszystkich steroidów w płynach biologicznych, a zatem zwiększa możliwości diagnostyczne, szczególnie podczas określania sterydów.

    III. Oznaczanie 25-hydroksywitaminy D metodą HPLC / MS / MS

    25-hydroksy witamina D (25OD) jest główną cyrkulującą formą witaminy D i prekursorem jej aktywnej formy. (1,25-dihydroksywitamina D). Ze względu na długi okres półtrwania, definicja 25OD jest ważna dla określenia statusu witaminy D w ciele pacjenta. Witamina D występuje w dwóch formach: witamina D3 (cholekalcyferol) i witamina D2 (ergokalcyferol). Obie formy są metabolizowane do odpowiednich postaci 25OD. Bardzo ważne dla diagnozy jest dostępność metod analitycznych, które mogą z dużą dokładnością określić obie formy witaminy i umożliwić monitorowanie pacjentów z naruszeniem witaminy D. Dotychczasowe metody nie pozwalały na odrębne oznaczanie witaminy D2 i D3. Ponadto przy wysokich stężeniach witaminy D2 wykrywalna ilość D3 jest zaniżona. Inną wadą jest zastosowanie radioaktywnych izotopów. Zastosowanie metody HPLC / MS / MS nie tylko uniemożliwiło stosowanie izotopów promieniotwórczych, ale również osobne określenie obu aktywnych form witaminy.

        Metodę stosuje się w przypadku następujących pacjentów:

  • Jeśli istnieje podejrzenie obniżonej zawartości witaminy D w organizmie;
  • W przypadku podejrzenia o niewyjaśniony efekt toksyczny;
  • Podczas badania pacjentów poddanych leczeniu ze zmniejszoną zawartością witaminy D;
  • Zastosowanie HPLC / MS / MS pozwoliło na oddzielne określenie obu postaci podczas monitorowania pacjentów.
  • IV. Oznaczanie immunosupresantów za pomocą HPLC / MS / MS

    Po przeszczepieniu narządu konieczne jest przyjmowanie leków immunosupresyjnych przez całe życie, aby uniknąć reakcji odrzucenia. Przy bardzo wąskim zakresie terapeutycznym i wysokiej toksyczności, środki immunosupresyjne wymagają indywidualnego dozowania, aby osiągnąć maksymalny efekt. W związku z tym ważne jest, aby monitorować główne leki immunosupresyjne: cyklosporyna A, takrolimus, sirolimus i ewerolimus regulacji leków dawka dla każdego indywidualnego pacjenta, w zależności od stężenia leku we krwi.

    Test immunologiczny nadal służy do monitorowania wymienionych leków, jednak metody te są drogie, a ich specyficzność, dokładność i powtarzalność są ograniczone. Zdarzały się przypadki śmierci pacjentów z niewłaściwego dawkowania leków immunosupresyjnych na podstawie wyników uzyskanych metodami immunologicznymi. Obecnie testy immunologiczne są zastępowane w laboratoriach klinicznych za pomocą HPLC / MS / MS. Tak więc w klinice Uniwersytetu w Monachium codziennie analizuje się około 70 próbek zawartości syrolimusa i cyklosporyny A przy użyciu systemu HPLC / MS / MS. Wszystkie przygotowania próbek i sterowanie urządzeniem wykonuje jeden pracownik. Laboratorium przełącza się również do analizy takrolimusu za pomocą tej metody.

    • Ujawniono zastosowanie HPLC / MS / MS w celu jednoczesnego określenia rutynowych sirolimus, takrolimus, askomycyny demetiksisirolimusa cyklosporyna A i cyklosporyna G we krwi. Zakres jest określony przez stężenie 1,0 - 80,0 ng / ml. Dla cyklosporyny, 25 do 2000 ng / ml. W ciągu roku analizowano ponad 50 000 próbek w laboratorium.
    • Ponieważ stwierdzono, że równoczesne stosowanie takrolimusu i syrolimusa daje pozytywny efekt terapeutyczny, opracowano prostą i skuteczną metodę HPLC / MS / MS do oddzielnego oznaczania ich we krwi do analiz klinicznych. Analiza jednej próbki trwa 2,5 minuty z dokładnością 2,46% -7,04% dla takrolimusu i 5,22% -8,30% dla syrolimusa dla całej krzywej analitycznej. Dolna granica oznaczania takrolimusu wynosi 0,52 ng / ml, sirolimus - 0,47 ng / ml.

    V. Oznaczanie homocysteiny za pomocą HPLC / MS / MS

    Homocysteiny jest zainteresowanie w leczeniu chorób sercowo-naczyniowych (zakrzepowo-zatorowej, choroby serca, miażdżyca tętnic), i innych stanów klinicznych (depresja, choroba Alzheimer'a, osteoporoza, powikłania ciąży i in.). Istniejące metody testu homocysteiny tym imunnoanaliz są kosztowne. Opracowany szybka metoda HPLC / MS / MS do analizy homocysteiny do rutynowej praktyce klinicznej do analizy dużej liczby próbek. Jonizacja prowadzona była za pomocą elektrorozpylania. Metoda jest powtarzalna, bardzo dokładna i dokładna. Zaletą tej metody są również niskie koszty odczynników i prostota przygotowania próbki. Za jeden dzień można przeanalizować 500 lub więcej próbek.

    Wniosek

    Należy zauważyć, że mimo iż obecnie stosowane znacząco ulepszonych metod immunologicznych, z powodu ograniczeń technicznych w zasadzie, metoda ta nie ma porównywalną dokładność HPLC IUMI i swoistość wobec substancji docelowej, szczególnie w obecności metabolitów. Prowadzi to nie tylko do niskiej dokładności metody ELISA oraz wysoki odsetek wyników fałszywie dodatnich i fałszywie ujemnych wyników, ale nie pozwala na porównanie wyników uzyskanych w różnych działach klinicznych za pomocą metody ELISA. Zastosowanie HPLC-MS / MS eliminuje tę wadę, pozwala na wysoce specyficzne, dokładną i szybką analizę dużych ilości próbek o dużej niezawodności, w obecności metabolity i bez zakłóceń od substancji towarzyszących i endogenne osocza i krwi pacjentów.

    Pomimo widocznych wysokich kosztów kompleksu instrumentów, jak pokazuje światowa praktyka, przy prawidłowym działaniu kompleks ten opłaca się w ciągu 1-2 lat. Wynika to przede wszystkim z niskiego kosztu jednej analizy ze względu na równoczesną analizę dziesiątek i setek połączeń oraz brak konieczności zakupu drogich zestawów diagnostycznych. Ponadto laboratorium ma możliwość niezależnego opracowania wszelkich niezbędnych technik analitycznych i nie zależy od producenta zestawów.

    Wybór prawidłowej konfiguracji zestawu wskaźników

    Istnieje wiele innych metod spektrometrii mas i typy spektrometrów mas przeznaczonych do rozwiązania szereg problemów - określenie strukturalne złożonych makrocząsteczek wagowych białka w kilkuset tysięcy daltonów do rutynowego wysokiej przepustowości ilościowej analizy drobnych cząsteczek.

    Aby skutecznie rozwiązać zadanie, jednym z głównych warunków jest wybór odpowiedniego rodzaju sprzętu. Nie ma uniwersalnego urządzenia, które pozwala rozwiązać całe spektrum problemów analitycznych. W ten sposób przyrząd zaprojektowany do rozwiązania problemu identyfikacji mikroorganizmów nie jest w stanie przeprowadzić ilościowej analizy małych cząsteczek. I odwrotnie. Faktem jest, że pomimo powszechnej nazwy są to całkowicie różne urządzenia, które działają na różnych fizycznych zasadach. W pierwszym przypadku jest TOF spektrometru źródłem jonizacji laserowej - MALDI-TOF, a drugi - potrójny kwadrupol z jonizacją przez elektrorozpylanie - ICN HPLC.

    Drugim najważniejszym parametrem jest wybór poprawnej konfiguracji systemu. Istnieje kilku głównych producentów sprzętu do spektrometrii mas. Urządzenia każdego producenta mają nie tylko swoje mocne strony, ale także słabe strony, o których zwykle wolą milczeć. Każdy producent wytwarza własną linię urządzeń. Koszt jednego kompleksu analitycznego mieści się w przedziale od 100 000 do 1 000 000 dolarów lub więcej. Wybór optymalnego producenta i poprawna konfiguracja sprzętu pozwoli nie tylko zaoszczędzić znaczne zasoby finansowe, ale także skuteczniej rozwiązać zadanie. Niestety, istnieje wiele przykładów, w których sprzęt laboratoryjny został wykonany bez uwzględnienia tych czynników. Rezultatem jest bezczynny sprzęt, zmarnowane pieniądze.

    Trzecim czynnikiem decydującym o udanym działaniu laboratorium jest personel. Spektrometry masowe wymagają wysoko wykwalifikowanego personelu. Niestety, w każdym kursie uniwersyteckim Rosja nie jest nowoczesna praktyka spektrometrii masowej, szczególnie do zastosowań klinicznych i kształcenia każdego laboratorium musi rozwiązać na własną rękę. Oczywiście 2-3 dni szkolenia zapoznawczego przeprowadzonego przez producenta po uruchomieniu sprzętu absolutnie nie wystarczą do zrozumienia podstawy metody i zdobycia umiejętności pracy nad urządzeniem.

    Czwartym czynnikiem jest brak gotowych technik analitycznych. Każde laboratorium ma własne priorytety, do rozwiązania których konieczne jest opracowanie własnych metod. Może to zrobić osoba, która ma co najmniej 2 do 3 lat doświadczenia w pracy nad urządzeniem. Producenci firm czasami dostarczają jedną lub dwie ogólne metody rekomendacji, ale nie dostosowują ich do konkretnych zadań laboratorium.

    W BioFarmExpert LLC specjaliści ds. pracy z wieloletnim doświadczeniem na różnych typach spektrometrów masowych, a także rozwój technik i ustalanie wysokowydajnych analiz. Dlatego zapewniamy następujące usługi:

    1. Wybór optymalnej konfiguracji urządzenia dla określonych zadań klienta.
    2. Zakup, dostawa i uruchomienie urządzeń wiodących producentów tandemowych spektrometrów masowych Stopniowe szkolenie personelu w ciągu roku od momentu uruchomienia urządzenia.
    3. Zestaw gotowych technik i baz danych do rozwiązywania podstawowych problemów klinicznych.
    4. Opracowanie technik analizy i rozwiązanie konkretnych zadań klienta w jego laboratorium z udziałem jego pracowników.
    5. Wsparcie metodyczne na wszystkich etapach pracy.

    Analiza krwi ze wstępną derywatyzacją (pochodne TMS)

    Dwuwymiarowa chromatografia gazowa - spektrometria masowa czasu przelotu dla analizy osocza krwi ze wstępną derywatyzacją (pochodne TMS) wykazujące oznaczanie glukozy 5TMS

    Analiza metabolitów osocza krwi za pomocą dwuwymiarowej spektrometrii masowej z chromatografią gazową ze spektrometrią masową ze wstępną derywatyzacją (pochodne TMC) demonstruje wykrycie glukozy 5TCS o wielkości 901 koincydencji.